可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白的理化特性研究

摘要：目的：研究可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(SCCⅡ）的物理化学特性。 方法：用光谱法测定吸收峰和等电点，HPLC法检测氨基酸组成，乌氏黏度计测定不同条件下溶液的增比黏度。用SDS-PAGE测定相对分子量（Mr），结合免疫印迹法分析胃蛋白酶、胰蛋白酶、α-糜蛋白酶和Ⅱ型胶原酶作用于SCCⅡ和热变性后的SCCⅡ（D-SCCⅡ）的酶解产物。 结果：SDSPAGE显示SCCⅡ亚基的Mr约为120×10³，能与抗SCCⅡ抗体反应；D-SCCⅡ含有10多条免疫印迹呈阳性反应的片段。SCCⅡ溶液的最大吸收峰为230 nm，等电点pH约6.25。氨基酸组成中，Gly、Pro、Glu和Ala含量高，芳香族氨基酸低。SCCⅡ溶液的增比黏度随浓度的增加而增加，在25~45 ℃范围内随着温度的升高逐渐下降。在胃蛋白酶和糜蛋白酶作用下SCCⅡ的电泳和免疫印迹图谱无变化，Ⅱ型胶原酶可使SCCⅡ快速水解，胰蛋白酶作用后出现10条免疫印迹阳性条带；D-SCCⅡ经酶解后免疫印迹无阳性条带。 结论:SCCⅡ具有独特的物理化学性质，对消化酶有一定抵抗作用，胰蛋白酶作用后可出现多条活性片段。