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白念珠菌烯醇化酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立
引用本文:胡毓安,李芳秋,马春芳,年娜.白念珠菌烯醇化酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J].临床检验杂志,2013,31(8):565-574.
作者姓名:胡毓安  李芳秋  马春芳  年娜
作者单位:南方医科大学南京临床医学院/南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002;南方医科大学南京临床医学院/南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002;南方医科大学南京临床医学院/南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002;南方医科大学南京临床医学院/南京军区南京总医院临床中心实验科,南京210002
基金项目:江苏省科技支撑计划-社会发展项目(BE2009673)。
摘    要:摘要:目的:建立检测白念珠菌烯醇化酶(enolase, Eno)的双抗体夹心ELISA法,并试用于几种真菌培养上清液的检测。 方法:将抗白念珠菌Eno单抗作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗Eno抗体作为检测抗体,用方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体浓度,建立检测Eno的ELISA法,对方法的精密度、特异性、最低检测限等指标进行评价。用该法检测白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、新生隐球菌和酿酒酵母等不同真菌培养上清中Eno水平。 结果:Eno浓度为20 ng/mL和5 ng/mL时,批内和批间变异系数(CV)分别为6.61%、9.19%和6.98%、13.81%;最低检测限为1.25 ng/mL。本法可从白念珠菌37 ℃培养24 h后的上清中检出Eno,Eno含量与白念珠菌菌丝含量呈正相关。本法对近平滑念珠菌有微弱交叉反应,与热带念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌、新生隐球菌和酿酒酵母均无交叉反应。 结论:建立的检测白念珠菌Eno的双抗体夹心ELISA方法有较好的特异性,可用于评价Eno检测在侵袭性白念珠菌感染中的诊断价值。

关 键 词:侵袭性念珠菌病  白念珠菌  烯醇化酶  双抗体夹心酶联免疫吸附试验
收稿时间:2013/5/16 0:00:00

Development of a sandwich ELISA for the detection of enolase from Candida albicans
Abstract:
Keywords:invasive candidiasis  Candida albicans  enolase  sandwich ELISA
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