建立基于gyrB基因检测结核分枝杆菌复合物的荧光定量PCR法

摘要：目的：建立基于gyrB基因扩增检测结核分枝杆菌复合物（MTC）的荧光定量PCR(FQ-PCR)法。方法：根据gyrB基因设计合成引物和探针，建立并评价TaqMan探针FQ-PCR法，并与基于IS6110序列的FQ-PCR法分别检测50例临床标本，比较两种方法的检测结果。结果：建立的FQ-PCR法标准曲线方程为Y=-3.18X+42.84，相关系数（r²）为0.995、扩增效率为106.25%，其检测灵敏度为10²） CFU/mL；MTC中结核分枝杆菌和非洲分枝杆菌阳性，其他分枝杆菌和4株临床其他细菌均为阴性。批内及批间变异系数(CV)均＜2%，重复性良好。本法与基于IS6110序列的FQ-PCR法对50例临床标本的检测结果差异无统计学意义（χ²）=0.06，P>0.05），一致性好(κ=0.94)。结论:基于gyrB基因扩增的FQ-PCR法灵敏度高、特异性强、重复性好，可用于结核分枝杆菌复合物的早期快速诊断。

Establishment of fluorescence quantitative PCR for detection of Mycobacterium tuberculosis complex based on gyrB gene amplification