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| RFP-AWP1原核表达载体的构建及表达特性研究 | |
| 引用本文： | 曹永宽,莫永炎,薛刚,王培红,姜勇,田伏洲.RFP-AWP1原核表达载体的构建及表达特性研究[J].华西医学,2008,23(4). |
| 作者姓名： | 曹永宽 莫永炎 薛刚 王培红 姜勇 田伏洲 |
| 作者单位： | 1. 成都军区总医院全军普通外科中心,四川成都,610083;南方医科大学休克微循环重点实验室,广州,510515 2. 南方医科大学休克微循环重点实验室,广州,510515 3. 成都军区总医院全军普通外科中心,四川成都,610083 |
| 摘 要： | 目的:建立红RFP-AWP1融合基因的原核表达载体,研究其表达蛋白特性。方法:将克隆的人AWP1(associated with protein kinase Crelated kinase 1,AWP1)和水母的红色荧光蛋白(redfluorescence protein,RFP)的cD-NA插入到原核表达载体pET-17b的多克隆位点(mutiple clone sites,MCS)中,经AWP1 cDNA的PCR鉴定和E.coli DE3中的表达鉴定后,E.coli DE3表达AWP1-RFP融合蛋白,荧光显微镜观察其表达特性及与GST-beads的pull-down实验。结果:成功构建了载体pET-AWP1-DsRed1,在大肠杆菌中获得了高效表达的AWP1-RFP融合蛋白,其活菌液在荧光显微镜下呈火山熔岩状的亮红色,干固的细菌呈斑片状红色荧光;AWP1-RFP融合蛋白可与GST-beads结合,并在激发波长为508nm的条件下呈红色荧光,而在波长为488 nm激发光条件下可见橙黄色荧光。结论:在体外验证了AWP1-RFP融合蛋白具有可视性表达的特点,同时发现其能与GST-beads结合,为pull-... |
| 关 键 词： | 人 红色荧光蛋白 大肠杆菌 |
Expression of Human AWP1-DsRed Fusion Protein in Prokaryotic Cells and Its Characteristic Investigation |
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| Abstract: | |
| Keywords: | AWP1 GST-beads |
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