| 同源重组敲除临床肺炎克雷伯菌质粒bla_(KPC-2)基因 |
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| 引用本文： | 仉英,田月如,艾芙琪,刘红,马逸珉,王蓓,蒋晓飞.同源重组敲除临床肺炎克雷伯菌质粒bla_(KPC-2)基因[J].检验医学,2014(6):603-606. |
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| 作者姓名： | 仉英 田月如 艾芙琪 刘红 马逸珉 王蓓 蒋晓飞 |
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| 作者单位： | 复旦大学附属华山医院检验科,上海200040 |
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| 摘 要： | 目的建立敲除临床肺炎克雷伯菌耐药菌株质粒上的耐药基因的方法。方法聚合酶链反应(PCR)分别扩增试验菌株待敲除目的基因blaKPC-2的上下游片段及质粒pMQ300的潮霉素耐药基因片段,采用重叠延伸基因扩增(SOE-PCR)技术构建融合片段,以耐阿普霉素的λred质粒pKOBEG-Apr为介导,同源重组敲除临床肺炎克雷伯菌耐药菌株的blaKPC-2基因。用含潮霉素和阿普霉素的LB培养基筛选重组子,用PCR和逆转录PCR扩增检测blaKPC-2基因、潮霉素耐药基因及药物敏感性验证重组子。结果不同多位点序列分析(MLST)型别的2株临床肺炎克雷伯菌耐药菌株的blaKPC-2基因得以敲除。结论λred同源重组法可以可靠敲除临床肺炎克雷伯菌耐药菌株质粒上的基因。
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| 关 键 词： | 基因敲除 同源重组 肺炎克雷伯菌 |
Homologous recombination knockout blaKPC-2 gene in clinical isolates of Klebsiella pneumonia |
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| ZHANG Ying,TIAN Yueru,AI Fuqi,LIU Hong,MA Yimin,WANG Bei,JIANG Xiaofei.Homologous recombination knockout blaKPC-2 gene in clinical isolates of Klebsiella pneumonia[J].Laboratory Medicine,2014(6):603-606. |
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| Authors: | ZHANG Ying TIAN Yueru AI Fuqi LIU Hong MA Yimin WANG Bei JIANG Xiaofei |
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| Institution: | . (Department of Clinical Laboratory, Huashan Hospital, Fudan University, Shanghai 200040, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene knockout Homologous recombination Klebsiella pneumonia |
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