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NF-κB靶向性哑铃形“圈套”寡核苷酸对体外肾小球系膜细胞细胞因子表达的影响
引用本文:张建国,王惠民,国华,郝天智,杨文军.NF-κB靶向性哑铃形“圈套”寡核苷酸对体外肾小球系膜细胞细胞因子表达的影响[J].实用医学杂志,2005,21(12):1257-1261.
作者姓名:张建国  王惠民  国华  郝天智  杨文军
作者单位:1. 400042,重庆市,第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所肾内科
2. 400042,重庆市,第三军医大学附属大坪医院第一研究室
基金项目:重庆市科委应用基础项目(编号:41A11537)
摘    要:目的:设计合成靶向NF-κB的哑铃形“圈套”ODNs,并检测其对NF-κB转录活性和肾小球系膜细胞细胞因子(TNF-α和IL-6)表达的抑制效应。方法:以NF-κB顺式作用元件κB序列为模板,设计包含两个拷贝的κB序列,长度为58个碱基的环状ODNS,合成后部分序列做FAM标记,行转集效率鉴定实验。采用电泳迁移率改变实验(EMSA)体外检测哑铃形圈套ODNs对NF-κB转录活性的抑制效应。提取大鼠肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将2、4、8mg/L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞,6h后用LPS刺激,收集转染后8、12、18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清细胞因子蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)法检测细胞因子mRNA转录。结果:阳离子脂质体可将哑铃形圈套ODNs高效转集入肾小球系膜细胞,哑铃形圈套ODNs在体外能有效地抑制NF-κB与其顺式元件的结合;4、8mg/L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TNF-α和IL-6转录与表达。结论:靶向N...

关 键 词:细胞因子类    肾小球肾炎    NF-κB    哑铃形圈套ODNs    
修稿时间:2004年9月21日

Inhibitory effect of circular dumbbell decoy ODNs targeting NF-κB on cytokinesexpression in mesangial cells in vitro
ZHANG Jian-guo,WANG Hui-min,GUO Hua,HAO Tian-zhi,YANG Wen-jun.Inhibitory effect of circular dumbbell decoy ODNs targeting NF-κB on cytokinesexpression in mesangial cells in vitro[J].The Journal of Practical Medicine,2005,21(12):1257-1261.
Authors:ZHANG Jian-guo  WANG Hui-min  GUO Hua  HAO Tian-zhi  YANG Wen-jun
Institution:ZHANG Jian-guo,WANG Hu i-min,GUO Hua,HAO Tian-zhi,YANG Wen-jun.Department of Renal Diseases,Dap in g Hospital,the Third Military Medical University,Chongqing 400042,Ch ina
Abstract:
Keywords:]Cytokines Glome rulonephritis NF-k appa B Circular dumbbell decoy Oligodeoxynucleotides
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