TGF—β1诱导肾小管上皮细胞转分化过程中对细胞骨架的影响

目的观察TGF-β1在诱导肾小管上皮细胞转分化过程中对细胞骨架的调节作用。方法选择正常大鼠肾小管上皮细胞株NRK52E，经TGF-β1（15μg／L）体外诱导3天，RT-PCR检测细胞廿平滑肌动蛋白（α-SMA）评价细胞的转分化状态，观察细胞形态，同时检测细胞骨架成分β-actin、α—tubulin mRNA的表达；免疫荧光染色观察上述细胞骨架蛋白在细胞内的排列。结果培养的NRK52E细胞经TGF-81体外诱导3天后，细胞中α—SMAmRNA的表达水平明显增多，高于相应的对照组细胞（P〈0．001），说明NRK52E上皮细胞出现了表型转化，此时培养细胞的形态也发生了改变，由典型的鹅卵石样变为成纤维细胞样，并有多个突起；细胞骨架蛋白β-actinmRNA的表达也明显增多（P〈0．05）；β—actin蛋白的排列也发生了改变，其在胞膜下形成的厚的板样结构消失，转而在胞浆中形成粗大的束状应力纤维，沿细胞长轴纵行排列，此外，β-actin尚在某些细胞边缘形成了片层样伪足和丝状伪足。微管成分α-tubulinmRNA的表达和分布与对照组比较无明显不同。结论TGF-β1能够诱导体外培养的NRK52E细胞转分化，在此过程中细胞形态发生了改变，骨架蛋白β-actin的表达增多并发生了重建，同时骨架蛋白α—tubulin未见明显变化。