恩再适对坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠痛觉过敏及其基因表达的影响

目的观察恩再适对坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)大鼠痛觉过敏及脊髓核因子-kappa B(NF-κB)、N-甲基D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)和胰腺炎相关蛋白Ⅰ(PAP Ⅰ)表达的影响。 方法选取104只180~220g雄性SD大鼠，参考Bennett和Xie的方法结扎大鼠左侧坐骨神经，建立CCI模型。按随机数字表法分为对照组和治疗组，每组52只。2组大鼠均在CCI术后24h进行封闭给药治疗。治疗组给予恩再适35μl、2%利多卡因10μl和维生素B12注射液5μl，加生理盐水至0.5ml，于坐骨神经结扎部位进行封闭；对照组仅给予0.5ml生理盐水、利多卡因和维生素B12混合液进行封闭。分别于术前1d、术后2、4、7、14和21d各时间点，测定各组大鼠机械缩足反射阈值(MWT)和后爪回缩潜伏期(PWL)，然后处死大鼠(每组8只)，取L4-6脊髓，分别采用实时定量聚合酶链反应(n=4)和蛋白质印迹法(n=4)检测脊髓NF-κB、NR2B和PAP Ⅰ的表达；并在术后7d时采用免疫组织化学染色方法检测2组大鼠(每组另4只)脊髓NF-κB、NR2B和PAP Ⅰ的免疫反应阳性神经元的表达。 结果①对照组术后第2、4、7、14和21天的MWT值［（21.48±1.09）、（15.99±0.98）、（8.84±0.82）、（11.30±0.62）和（14.21±0.91）g］分别较组内术前1d时［（26.31±1.26）g］明显下降，而治疗组对应时间点的MWT值［（23.56±1.03）、（19.08±0.96）、（14.11±0.80）、（16.21±0.66）和（18.33±0.75）g］均较同时间点对照组明显增加（P<0.05）；②对照组术后第2、4、7、14和21天的PWL值［（15.30±0.77）、（11.46±0.62）、（6.70±0.74）、（8.85±0.69）和（11.22±0.71）s］分别较组内术前1d时［（18.25±0.80）s］明显下降，而治疗组对应时间点的PWL值［（15.66±0.65）、（12.67±0.57）、（9.48±0.47）、（10.43±0.49）和（13.08±0.84）s］与同时间点对照组相比，除术后第2天组间差异无统计学意义（P&rt;0.05）外，均明显增加（P<0.01）；③对照组术后脊髓NF-κB、NR2B和PAP Ⅰ的表达较组内术前明显升高(P<0.05)，治疗组脊髓NF-κB和NR2B表达较同时间点对照组明显降低(P<0.05)，而脊髓PAP Ⅰ表达则明显增加(P<0.05)；④术后第7天，治疗组大鼠脊髓NF-κB和NR2B的积分光密度(IOD)值明显低于对照组（P<0.01），而其PAP Ⅰ的IOD值则明显高于对照组（P<0.01）。 结论CCI大鼠痛觉过敏的产生和发展与脊髓NF-κB、NR2B和PAP Ⅰ的表达有关，恩再适封闭治疗改善CCI大鼠痛觉过敏可能是通过下调脊髓NF-κB和NR2B以及上调PAP Ⅰ的表达实现的。