| 变异链球菌表面蛋白SpaP P区真核表达质粒的构建及表达 |
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| 引用本文： | 白国辉,刘建国,柴巧学,曲云鹏,管晓燕,韩琪,杨德琴.变异链球菌表面蛋白SpaP P区真核表达质粒的构建及表达[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(15). |
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| 作者姓名： | 白国辉 刘建国 柴巧学 曲云鹏 管晓燕 韩琪 杨德琴 |
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| 作者单位： | 遵义医学院口腔医学院口腔内科学教研室,贵州省遵义市,563000 |
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| 基金项目： | 贵州省优秀青年科技人才基金，贵州省省长基金，贵州省教育厅重点项目 |
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| 摘 要： | 背景:变异链球菌是龋病的主要致龋菌,针对介导变异链球菌非蔗糖依赖性黏附的重要毒力因子SpaP的基因疫苗在理论上能对抗变异链球菌黏附于牙面和进一步破坏牙体硬组织.目的:构建变异链球菌表面蛋白P区(SpaP/P)真核表达质粒pVAX1-spapiP,并观察其在哺乳动物细胞COS.7中的表达.方法:通过基因重组技术,构建真核表达质粒pVAX1-spap/P,并经酶切分析、测序分析鉴定正确后,采用脂质体转染法,将其转染至COS-7细胞中,然后经免疫组织化学SABC法检测其在细胞中的表达.结果与结论:真核表达质粒pVAX1-spap/P经EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切分析,证实携带1.2 kb的目的基因spapiP片段,经测序分析,目的基因正向插入到预先设计的载体位点处.pVAX1-spap/P转染的细胞胞质呈褐色,pVAX1空载体质粒转染的细胞胞质中无着色.证实实验成功构建真核表达质粒pVAX1-spap/P,所携带的基因序列正确,能够在真核细胞COS-7中正确表达目的蛋白.
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| 关 键 词： | 变异链球菌 龋病 疫苗 表面蛋白 真核表达 |
Construction and expression of eukaryotic plasmid pVAX1-spap/P in mammalian cells |
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| Bai Guo-hui,Liu Jian-guo,Chai Qiao-xue,Qu Yun-peng,Guan Xiao-yan,Han Qi,Yang De-qin.Construction and expression of eukaryotic plasmid pVAX1-spap/P in mammalian cells[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(15). |
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| Authors: | Bai Guo-hui Liu Jian-guo Chai Qiao-xue Qu Yun-peng Guan Xiao-yan Han Qi Yang De-qin |
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| Institution: | Bai Guo-hui,Liu Jian-guo,Chai Qiao-xue,Qu Yun-peng,Guan Xiao-yan,Han Qi,Yang De-qin Department of Stomatology,School of Stomatology,Zunyi Medical College,Zunyi 563003,Guizhou Province,China |
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| Abstract: | BACKGROUND:Streptococcus mutans is the main pathogenic bacterium for dental caries.In terms of the gene vaccine's SpaP which mediate Streptococcus mutans non-sucrose dependent adherency,it antagonizes academically Streptococcus mutans,which adheres to dental facing and makes the tooth tissue worse.OBJECTIVE:To construct eukanyotic plasmid pVAX1-spap/P of surface protein antigen P of Streptococcus mutans and to evaluate the expression of the plasmid in mammalian cells COS-7.METHODS:The eukaryotic plasmid car... |
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| Keywords: | pVAX1 |
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