| 小分子干扰RNA真核表达载体阻断U937细胞肿瘤坏死因子α基因的表达 |
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| 引用本文： | 孙克宁,高希武,王真,金群华.小分子干扰RNA真核表达载体阻断U937细胞肿瘤坏死因子α基因的表达[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(30). |
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| 作者姓名： | 孙克宁 高希武 王真 金群华 |
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| 作者单位： | 宁夏医科大学附属医院骨科三病区,宁夏回族自治区银川市,750004 |
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| 摘 要： | 背景:无菌性松动是导致人工关节置换后失败和降低人工关节使用寿命的主要原因,肿瘤坏死因子α是一个极具吸引力的无菌性松动治疗新靶点.小分子干扰RNA作为一种新型的基因阻断技术,被广泛用于新基因筛选、基因功能鉴定、信号转导研究以及基因治疗方面,显示出广阔的应用前景.目的:构建人肿瘤坏死因子α基因的小分子干扰RNA真核表达载体,观察其对U937细胞中肿瘤坏死因子α基因表达的干涉作用.方法:将合成的2对小分子干扰RNA寡核苷酸链分别退火形成双链,连接入pSilencer4.1-CMV neo真核表达载体,分别命名为pSilencer-T1和pSilencer-T2,经酶切及测序鉴定.电转染法转染重组质粒入U937细胞,G418筛选后反转录-聚合酶链反应检测其对肿瘤坏死因子α基因mRNA的干涉效果.结果与结论:经酶切及测序鉴定,成功构建了siRNA真核表达载体,经电转染法转染U937细胞后,反转录-聚合酶链反应显示所构建的干涉肿瘤坏死因子α基因的真核表达载体成功地抑制了目的基因的表达,U937细胞中肿瘤坏死因子α基因的mRNA表达水平明显降低.提示成功构建了人肿瘤坏死因子α基因的RNA干涉真核表达载体pSilencer-T1和pSilencer-T2,并在U937细胞中有效地发挥了对肿瘤坏死因子α基因表达的干涉作用.
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| 关 键 词： | 无菌性松动 肿瘤坏死因子α 小分子干扰RNA 真核表达载体 U937细胞 |
Blocking effect of vector-based small interfering RNA on tumor necrosis factor-alpha gene expression in human U937 cells |
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| Sun Ke-ning,Gao Xi-wu,Wang Zhen,Jin Qun-hua.Blocking effect of vector-based small interfering RNA on tumor necrosis factor-alpha gene expression in human U937 cells[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(30). |
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| Authors: | Sun Ke-ning Gao Xi-wu Wang Zhen Jin Qun-hua |
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