lncRNA PAX8-AS1对小鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的调控影响

目的 观察lncRNA PAX8-AS1对小鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌细胞凋亡的调控影响.方法 通过左冠状动脉前降支结扎构建AMI模型小鼠.取AMI模型构建成功的雄性小鼠64只,随机选择48只小鼠,于术后0、1、2、3、4、5d各处死8只小鼠,作为AMI组.小鼠选择方式同AMI组,并采取与AMI小鼠相同的手术方式,但不进行左冠状动脉前降支结扎,于术后0、1、2、3、4、5d各处死8只小鼠,作为Sham组.Sham组中剩余小鼠随机分为Sham+ Ad-shCon组(8只)、Sham+ Ad-shPAX8-AS1组(8只);AMI组中小鼠随机分为AMI+ Ad-shCon组(8只)、AMI+ Ad-shPAX8-AS1组(8只).采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测AMI组和Sham组小鼠术后心肌组织中PAX8-AS1水平变化.采用红四氮唑(TTC)染色法检测Sham+Ad-shCon组、Sham+ Ad-shPAX8-AS1组、AMI+ Ad-shCon组、AMI+ Ad-shPAX8-AS1组小鼠梗死面积(IS)/危险区域(ARR);采用TUNEL染色法检测小鼠心肌细胞凋亡水平;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫组化及蛋白质印迹法检测小鼠心肌组织PAX8-AS1 (RT-PCR)、B淋巴细胞瘤-2相关x蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及裂解的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase3)表达水平.结果 AMI组小鼠PAX8-AS1表达水平随着AMI术后时间的延长而增加,在术后第3天其PAX8-AS1表达水平达到最高值,并高于Sham组,差异有统计学意义(P＜0.05).与Sham+ Ad-shCon组比较,Sham+ Ad-shPAX8-AS1组PAX8-AS1表达下调,差异有统计学意义(P＜0.05),AMI+ Ad-shCon组及AMI+ Ad-shPAX8-AS1组PAX8-AS1、IS/ARR、心肌细胞的凋亡指数、Bax及cleaved-caspase3均上调,Bcl-2下调,差异有统计学意义(P＜0.05).与AMI+ Ad-shCon组比较,AMI+ Ad-shPAX8-AS1组PAX8-AS1、IS/ARR、心肌细胞的凋亡指数、Bax及cleaved-caspase3下调,Bcl-2上调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PAX8-AS1在AMI心肌组织中呈高表达,PAX8-AS1低表达可减少梗死面积,抑制心肌细胞凋亡,其作用可能与调节凋亡蛋白有关.

Effects of lncRNA PAX8-AS1 on apoptosis of myocardial cells after acute myocardial infarction in mice