| H5亚型禽流感灭活疫苗病毒基因的定量检测及其与HI抗体效价之间关系的分析 |
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| 引用本文： | 韩剑锋,宁宜宝,蒋桃珍,李宁,吴涛,李俊平,王嘉,王哲,李启红,宋立,杨承槐.H5亚型禽流感灭活疫苗病毒基因的定量检测及其与HI抗体效价之间关系的分析[J].中华微生物学和免疫学杂志,2007,27(12):1139-1144. |
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| 作者姓名： | 韩剑锋 宁宜宝 蒋桃珍 李宁 吴涛 李俊平 王嘉 王哲 李启红 宋立 杨承槐 |
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| 作者单位： | 中国兽医药品监察所检测技术室,农业部兽药创新与生物安全评价重点开放实验室,北京,100081 |
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| 基金项目： | 科技部高致病性禽流感防治专项（2004BA519A24） |
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| 摘 要： | 目的建立H5亚型禽流感病毒灭活疫苗中病毒核酸的特异、敏感、快速的定量检测方法，分析其与HI抗体效价之间的相关性。探索禽流感灭活疫苗效力体外检验的方法。方法选取H5亚型禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）血凝素（hemagglutinin，HA）基因保守序列，使用Prinler Express 2．0软件设计了特异性引物和TaqMan MGB（minor groove binder）探针，利用实时荧光PCR技术来定量检测禽流感灭活疫苗，通过体外转录，制备含有选定检测序列的RNA标准品，绘制标准曲线。对50批H5亚型禽流感灭活疫苗进行了荧光定量PCR检测，测定了疫苗的HA基因拷贝数，同时测定了50批疫苗相应的HI抗体效价。进行了疫苗的HA基因拷贝数与HI抗体效价之间相关性的分析。结果该方法的灵敏度为10拷贝，反应，标准曲线的相关系数为0．998003，对H9亚型禽流感灭活疫苗和其他禽病疫苗无交叉反应，特异性好、重复性佳。疫苗的HA基因拷贝数与HI抗体效价不相关。结论荧光定量PCR方法为H5亚型禽流感病毒灭活疫苗检测提供了一种特异、敏感、快速的定量检测方法。
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| 关 键 词： | 禽流感灭活疫苗 TaqMan MGB探针 实时荧光PCR HI抗体效价 |
| 收稿时间： | 2007-01-17 |
Rapid quantitative detection of H5 subtype avian influenza inactivated vaccine by real-time fluorescent PCR and exploration of vaccine efficacy by in vitro test |
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| HAN Jian-feng,NING Yi-bao,JIANG Tao-zhen,LI Ning,WU Tao,LI Jun-ping,WANG Jia,WANG Zhe,LI Qi-hong,SONG Li,YANG Cheng-huai.Rapid quantitative detection of H5 subtype avian influenza inactivated vaccine by real-time fluorescent PCR and exploration of vaccine efficacy by in vitro test[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2007,27(12):1139-1144. |
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| Authors: | HAN Jian-feng NING Yi-bao JIANG Tao-zhen LI Ning WU Tao LI Jun-ping WANG Jia WANG Zhe LI Qi-hong SONG Li YANG Cheng-huai |
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| Institution: | Key Laboratory of Veterinary Drug Innovation and Biosafety Evaluation of Ministry of Agrictdture, China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Avian influenza inactivated vaccine TaqMan MGB probe Real-time fluorescent PCR HI antibody titer |
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