| 抗HBsAg和抗RBC双特异minibody载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 陈宇萍,乔媛媛,化冰,刘晓琳,谢帮铁,马大龙,王琰.抗HBsAg和抗RBC双特异minibody载体的构建及表达[J].中国免疫学杂志,2001,17(6):298-301. |
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| 作者姓名： | 陈宇萍 乔媛媛 化冰 刘晓琳 谢帮铁 马大龙 王琰 |
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| 作者单位： | 解放军海军总医院中心实验科, |
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| 基金项目： | 全军医药卫生重点课题(96Z004) |
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| 摘 要： | 目的：用抗HBsAg和抗RBC单链抗体构建双特异minibody抗体模型。方法：将人IgG1 CH3经点突变方式，在CH3界面由大分子氨基酸代替小分子氨基酸形成“knob”（T366W）（杵状结构），另一个CH3分子由3个小分子氨基酸代替3个大分子氨基酸形成“hole”（T366S：L368A：Y407V）（臼状结构），并在此基础上在适当位置上引入半胱氨酸残基形成二硫键（S354C：T366W／Y349C：T366S：L368A：Y407V）。 然后将“knob”和“hole”分别接连于抗HBsAg和抗RBC单链抗体基因3’端，并将两基因组装于同一表达载体中，在大肠杆菌中分泌表达。结果：依CH3界面不同共构建3种不同的表达载体，分别带有①野生型CH3；②杵臼结构（T366W／T366S：L368A：Y407V）突变型CH3，③杵臼结构加二硫键（S354C：T366W／Y349C：T366S：L368A：Y407V）突变型CH3。大肠杆菌分泌表达后，ELISA法检测抗HBsAg和抗RBC活性，3种表达上清均有相同的抗HBsAg和抗RBC活性；两种带有突变型CHE的minibody用血球凝集法可检测到抗HBsAg和抗RBC双特异活性。结论：CH3界面经适当改造可促进异源二聚体形成，并在大肠杆菌获得功能性表达，得到双特异minibody。
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| 关 键 词： | CH3 knob－into－hole Minibody 双特异抗体 突变型基因 |
| 文章编号： | 1000-484X(2001)06-0298-04 |
Construction and expression of anti-HBsAg and anti-RBC bispecific minibody |
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| CHEN Yu Ping,QIAO Yuan Yuan,HUA Bing et al.Navy General Hospital,Beijing.Construction and expression of anti-HBsAg and anti-RBC bispecific minibody[J].Chinese Journal of Immunology,2001,17(6):298-301. |
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| Authors: | CHEN Yu Ping QIAO Yuan Yuan HUA Bing Navy General Hospital Beijing |
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| Institution: | CHEN Yu Ping,QIAO Yuan Yuan,HUA Bing et al.Navy General Hospital,Beijing 100037 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CH 3 knob into hole Minibody Bispecific antibody |
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