RNA干扰技术抑制EMMPRIN表达对人绒癌细胞JEG-3侵袭性的实验研究

目的研究RNA干扰技术抑制人绒癌JEG-3细胞EMMPRIN的表达，探讨EMMPRIN在滋养细胞侵袭行为中的作用。方法设计、体外化学合成靶向EMMPRIN的短发夹状双链RNA（shRNA），分别与脂质体LipofectamineTM2000结合后转染体外培养的人绒癌细胞系JEG-3。分为A实验组：每组中加入1μg重组质粒和5μl阳离子脂质体Metafectene；B阴性对照组：只加5山脂质体转染试剂；C无关对照组（无关dsRNA对照组，载体试剂盒自带）。三组细胞孵育48h后，Western blot和RT—PCR技术检测EMMPRIN蛋白和mRNA的表达，明胶酶谱测定MMP2，9的表达。结果RNA干扰技术可以显著的靶向抑制EMMPRIN基因在人绒癌细胞中的表达，与B组和C组相比，A组细胞EMMPRIN蛋白和EMMPRINmRNA表达分别减少了75．2％和62，3％（P〈0．01）；B、C组EMMPRIN蛋白和EMMPRINmRNA表达分别减少了3．3％、2．4％和3．2％、1.8％（P〉0．05）；A组细胞在转染后的12.24，36.48小时MMP2的分泌分别下降了13．5％，29．6％。58.3％和66.6％；MMP9的分泌分别下降了10.7％，33．8％，47.5％和62．6％，相邻组间比较差异显著（P〈0.05）。结论EMMPRIN与滋养细胞的侵袭功能密切相关，抑制滋养细胞中EMMPRIN的表达可以抑制滋养细胞的侵袭。

Study on the RNAi inhibit expression of EMMPRIN and invasion of JEG-3