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腺病毒介导MCP-1-siRNA对人单核细胞体外迁移能力的影响
引用本文:谭力,缪洪明,甘立霞,卢忠燕,陈姗.腺病毒介导MCP-1-siRNA对人单核细胞体外迁移能力的影响[J].医学分子生物学杂志,2008,5(6).
作者姓名:谭力  缪洪明  甘立霞  卢忠燕  陈姗
基金项目:国家自然科学基金,全军医学科研"十一五"计划国际合作项目,第三军医大学学员创新基金
摘    要:目的 构建针对单核细胞趋化蛋白1(monoeyte chemoattractant protein 1,MCP-1)基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒,探讨干扰MCP-1表达对人单核细胞白血病株THP-1迁移能力的影响.方法 设计并合成针对人MCP-1的siRNA的靶DNA序列,克隆于穿梭载体pAdTrack-CMV中,与带有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的BJ5183细菌中进行同源重组,获得重组腺病毒载体pAdeasy-si-MCP-1,转染人胚肾细胞株293细胞,包装并扩增病毒颗粒.体外感染能表达MCP-1的293细胞,RT-PCR检测siRNA对MCP-1转录水平影响.Millicell细胞迁移实验检测对人单核细胞白血病株THP-1体外迁移能力的影响.结果 高糖诱导下,人293细胞MCP-1的表达增强;而Ad-si-MCP-1感染后,能够显著抑制高糖刺激的MCP-1 mR-NA水平的升高;Ad-si-MCP-1感染293细胞后的培养上清对THP-1的趋化作用较高糖刺激组及其siRNA阴性对照组显著降低.结论 成功构建了抑制MCP-1表达的siRNA腺病毒载体,其抑制MCP-1表达可明显抑制高糖诱导的THP-1的趋化作用,提示MCP-1表达的干预可能为糖尿病肾病等MCP-1相关疾病提供新的预防和治疗手段.

关 键 词:单核细胞趋化蛋白1  糖尿病肾病  腺病毒介导  体外迁移能力

Influence of Adenovirus Mediated MCP-1-siRNA on the Migration of Human Monocytes in vitro
TAN Li,MIAO Hongming,GAN Lixia,LU Zhongyan,CHEN Shan.Influence of Adenovirus Mediated MCP-1-siRNA on the Migration of Human Monocytes in vitro[J].Journal of Medical Molecular Biology,2008,5(6).
Authors:TAN Li  MIAO Hongming  GAN Lixia  LU Zhongyan  CHEN Shan
Abstract:
Keywords:
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