| 趋化因子MIP-3α的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 罗福康,郑红,沈大斌.趋化因子MIP-3α的克隆与表达[J].中国局解手术学杂志,2005,14(2):91-93. |
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| 作者姓名： | 罗福康 郑红 沈大斌 |
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| 作者单位： | [1]第三军医大学：附属西南医院实验研究中心,重庆400038／／附属新桥医院检验科,重庆400037 [2]第三军医大学附属西南医院实验研究中心,重庆400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (3 0 170 90 0 ) |
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| 摘 要： | 目的 克隆人趋化因子MIP-3α基因，表达并初步纯化MIP-3α融合蛋白。方法从扁桃体中提取总RNA，再进行RT-PCR，扩增MIP-3a成熟蛋白基因，并在5’和3’分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点，通过这两个酶切位点重组于pET32a( )载体上，转化E．coli．DH5α，筛选阳性克隆，酶切鉴定，DNA测序检测插入序列的正确性，缺失突变获得MIP-3α天然蛋白表达载体pET32a( )／MIP-3α，SDS-PAGE分析其表达，Westernblot验证融合蛋白。大量表达并初步纯化MIP-3α融合蛋白。结果 成功克隆了MIP-3α基因，表达并初步纯化得到MIP-3α融合蛋白。结论构建的MIP-3α硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式表达MIP-3α硫氧还蛋白。
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| 关 键 词： | MIP-3α 融合表达 载体 Western blot 蛋白纯化 |
| 文章编号： | 1672-5042(2005)02-0091-03 |
| 修稿时间： | 2004年12月25 |
Gene cloning and expression of human chemokine MIP-3α |
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| LUO Fu-kang,ZHENG Hong,SHEN Da-bin.Gene cloning and expression of human chemokine MIP-3α[J].Journal of Regional Anatomy and Operative Surgery,2005,14(2):91-93. |
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| Authors: | LUO Fu-kang ZHENG Hong SHEN Da-bin |
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