| 结核分枝杆菌铁氧还蛋白还原酶FdrA和FprA在CYP125A1的电子传递链中的作用分析 |
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| 引用本文： | 乔峰,张健美,白银磊,杨信怡,李聪然,李国庆,胡辛欣,游雪甫.结核分枝杆菌铁氧还蛋白还原酶FdrA和FprA在CYP125A1的电子传递链中的作用分析[J].中国医药生物技术,2012,7(3):178-186. |
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| 作者姓名： | 乔峰 张健美 白银磊 杨信怡 李聪然 李国庆 胡辛欣 游雪甫 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所药理室,北京,100050 |
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| 基金项目： | “十二五”国家科技重大专项(2012ZX09301002-005、2012ZX09301002-001) |
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| 摘 要： | 目的体外评价结核分枝杆菌(Mtb)铁氧还蛋白还原酶FdrA和FprA的活性,探索它们分别与两种铁氧还蛋白的偶联作用,并分析它们在CYP125A1的电子传递链中的作用。方法采用大肠杆菌作为宿主克隆结核分枝杆菌FdrA、FprA和CYP125A1编码基因并进行蛋白外源表达;以NADH或NADPH为电子供体,2,6-二氯酚靛酚(DCPIP)为电子受体评价FdrA及FprA的活性;应用细胞色素C为电子受体研究FdrA或FprA与不同铁氧还蛋白的偶联作用;分析CYP125A1对4-胆甾烯-3-酮的代谢作用进而研究FdrA和FprA在CYP125A1的电子传递链中的作用。结果 FdrA对NADH亲和力较高,Fdx对FdrA活性有明显提升作用,菠菜铁氧还蛋白(spFDX)对其活性没有提升作用,FdrA/Fdx和FdrA/spFDX均不能支持CYP125A1的活性。FprA对NAPDH亲和力较高,Fdx和spFDX均对FprA活性有明显提升作用,Fdx尤甚,FprA/spFDX可以支持CYP125A1的活性,FprA/Fdx不能支持CYP125A1的活性。结论 FprA是结核分枝杆菌CYP125A1的电子传递链蛋白,FdrA可能不是CYP125A1的电子传递链蛋白。
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| 关 键 词： | 分枝杆菌 结核 铁氧还蛋白 NAPP 还原酶 细胞色素P450酶系统 电子传递链复合蛋白质类 |
| 收稿时间： | 2012-02-28 |
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