| 一株新型鼠抗人PD-L2单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定 |
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| 引用本文： | 白利雄,陈永井,周莹,张雪琨,马钰,张学光.一株新型鼠抗人PD-L2单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定[J].现代免疫学,2011(4). |
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| 作者姓名： | 白利雄 陈永井 周莹 张雪琨 马钰 张学光 |
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| 作者单位： | 苏州大学医学部医学生物技术研究所;江苏省干细胞重点实验室;江苏省临床免疫研究所; |
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| 基金项目： | 国家自然科学青年基金资助项目(30800997);国家自然科学基金重点项目(30930085C0803); 2008年度教育部长江学者和创新团队(IRT0849) |
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| 摘 要： | 为了研制特异性识别人PD-L2(B7-DC,CD273)的鼠单克隆抗体,并对其生物学特性和PD-L2分子的表达特性进行初步分析。以高表达人PD-L2分子的基因转染细胞L929/PD-L2作为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,以L929/PD-L2作为抗体筛选细胞,L929/mock为对照细胞,经间接免疫荧光标记和流式细胞术分析、反复筛选和多次克隆化培养,筛选出分泌特异性鼠抗人PD-L2单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用Western blot、Ig亚型快速定性试纸法、间接免疫荧光法和竞争结合抑制实验对单抗进行生物学特性的分析,继而利用该单抗进行免疫荧光标记和流式细胞术检测PD-L2在肿瘤细胞株和免疫细胞上的表达特性。结果显示,通过多次融合和反复筛选,成功获得一株特异性鼠抗人PD-L2(B7-DC)的杂交瘤,该杂交瘤分泌的单克隆抗体能特异识别人PD-L2分子。继而利用上述研制获得的单克隆抗体8F2进行免疫荧光标记和流式细胞术检测发现,PD-L2上调性表达在成熟的树突状细胞和调节性T细胞上。提示,成功地获得一株特异性鼠抗人PD-L2单克隆抗体,并对其生物学特性和表达谱进行初步分析,证明其识别抗原表位不同于商品化抗体,是一株新型鼠抗人PD-L2单抗,这为进一步研究PD-1/PD-L2信号通路在免疫应答中的生物学作用提供了有价值的物质基础。
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| 关 键 词： | 协同刺激分子 单克隆抗体 PD-L2 PD-1 |
Preparation and characterization of a novel monoclonal antibody against human PD-L2(B7-DC) |
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| BAI Li-xiong,CHEN Yong-jing,ZHOU Yin,ZHANG Xue-kun,MA Yu,ZHANG Xue-guang.Preparation and characterization of a novel monoclonal antibody against human PD-L2(B7-DC)[J].Current Immunology,2011(4). |
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| Authors: | BAI Li-xiong CHEN Yong-jing ZHOU Yin ZHANG Xue-kun MA Yu ZHANG Xue-guang |
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| Institution: | BAI Li-xiong,CHEN Yong-jing,ZHOU Yin,ZHANG Xue-kun,MA Yu,ZHANG Xue-guang(Medical Biotechnology Institute of Soochow University,Suzhou 215007,China) |
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| Abstract: | A functional monoclonal antibody against human PD-L2(B7-DC,CD273) molecule was prepared and their biological characteristics was analyzed in the present study.The highly expressed human PD-L2 was transfected to L929/PD-L2 cell line and the expressed molecule was used as the immunogen to immunize BALB/c mice.By means of hybridoma cell fusion technique,LD29/PD-L2 cells was used as the target cells,while L929/mock cell was used as the negative control.The hybridoma specifically secreting mouse anti-human PD-L2... |
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| Keywords: | costimulatory molecular monoclonal antibody PD-L2 PD-1 |
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