表达载体pRSET C重组rhTNF—β的表达及其纯化 |
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引用本文: | 邱莲女,陈常庆.表达载体pRSET C重组rhTNF—β的表达及其纯化[J].细胞与分子免疫学杂志,1999,15(3):167-169. |
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作者姓名: | 邱莲女 陈常庆 |
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作者单位: | [1]浙江大学生命科学学院免疫工程实验室 [2]中国科学院上海生物工程研究中心 |
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基金项目: | 国家自然科学基金!No .39670 81 5,浙江省自然科学基金!No .3970 50 |
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摘 要: | 将hTNF-β N端缺失23个氨基酸的基因,克隆在表达载体pRSET C的6个组氨酸序列和肠激酶酶切位点序列的下游,以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,rhTNF-β获得了高表达,表达量占细胞总蛋白的26%,其表达产物大部分以可溶性形式形成。菌体裂解上清经0.45μm的滤膜过滤后,用固定化金属配体亲和柱层析,纯度可达95%左右;经肠激酶酶切后,具有TNF-β的细胞毒活性,此活
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关 键 词: | 表达载体 pRSET C rhTNF-β 表达 纯化 |
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