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HBV基因组各基因真核表达载体的构建及转染
引用本文:汤玉瑜,陈永文,郭晟,吴玉章.HBV基因组各基因真核表达载体的构建及转染[J].免疫学杂志,2008,24(3):251-254.
作者姓名:汤玉瑜  陈永文  郭晟  吴玉章
作者单位:第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所,重庆,400038
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:目的 构建HBV基因组各基因真核表达载体,转染HepG2细胞,建立稳定转染的HepG2细胞系.方法 采用PCR方法,以HBV全基因组质粒为模板扩增HBV基因的各基因片段,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1( ),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染HepG2细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的HepG2细胞系,用细胞流式技术及细胞免疫组化技术检测HBV各基因产物在细胞内的表达.结果 成功构建了pcDNA3.1( )/HBs、pcDNA3.1( )/HBc、pcDNA3.1( )/HBe、pcDNA3.1( )/HBp、pcDNA3.1( )/HB-preS1、pcDNA3.1( )/HB-preS2、pcDNA3.1( )/HBx真核表达载体,并建立了稳定转染的HepG2细胞系,成功地表达目的 基因.结论 真核表达载体成功构建和稳定转染HepG2细胞系的建立为进一步研究各基因的功能奠定良好的实验基础.

关 键 词:HBV  真核表达载体  稳定转染的HepG2细胞系  基因表达
文章编号:1000-8861(2008)03-0251-04
修稿时间:2008年1月21日

Construction of eukaryotic expression vectors of HBV genes and transfection
TANG Yu-yu,CHEN Yong-wen,GUO Sheng,WU Yu-zhang.Construction of eukaryotic expression vectors of HBV genes and transfection[J].Immunological Journal,2008,24(3):251-254.
Authors:TANG Yu-yu  CHEN Yong-wen  GUO Sheng  WU Yu-zhang
Abstract:
Keywords:
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