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HSP70基因的克隆与表达
引用本文:金欢胜,吴雄飞,金锡御,杨青浩,倪兵. HSP70基因的克隆与表达[J]. 免疫学杂志, 2005, 21(3): 201-204
作者姓名:金欢胜  吴雄飞  金锡御  杨青浩  倪兵
作者单位:第三军医大学西南医院肾科,重庆 400038;第三军医大学新桥医院泌尿外科,重庆 400037;第三军医大学西南医院肾科,重庆 400038;第三军医大学新桥医院泌尿外科,重庆 400037;第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆 400038
摘    要:目的 构建HSP70真核表达质粒以用于肾脏缺血预适应中HSP70作用及机制研究。方法用肝癌细胞系HepG2,用RT-PCR方法扩增HSP70cDNA,并利用T载体作为过渡,将HSP70基因克隆到真核表达载体pAAV-MCS中。重组质粒转染NIH3T3细胞,Western-blot法鉴定重组质粒HSP70/pAAV-MCS能在哺乳动物细胞中正确表达。结果RT-PCR方法正确地扩增出了全长HSP70基因。限制性内切酶酶切和测序结果证实HSP70基因克隆完全正确。重组质粒转染哺乳动物细胞系NIH3T3后,ECL-Western-blottimg法证实了目的基因能在其中正确表达。结论成功地克隆真核表达重组质粒HSP70/pAAV-MCS,为下一步研究HSP70在肾脏缺血预适应的作用及其机制打下基础。

关 键 词:HSP70  缺血预适应  真核表达质粒  肾脏
文章编号:1000-8861(2005)03-0201-04
修稿时间:2004-11-04

Cloning and expression of HSP70 gene
JIN Huan-sheng,WU Xiong-fei,JIN Xi-yu,YANG Qing-hao,NI Bing. Cloning and expression of HSP70 gene[J]. Immunological Journal, 2005, 21(3): 201-204
Authors:JIN Huan-sheng  WU Xiong-fei  JIN Xi-yu  YANG Qing-hao  NI Bing
Abstract:
Keywords:HSP70  Ischemia precondition  Eukaryotic rexpressing plamids  Kidney
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