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Rap1GAP基因表达上调对HL-60细胞体内及体外侵袭能力的影响
引用本文:邱婷婷,李德鹏,李振宇,徐开林,祁小飞,岑建农,陈子兴. Rap1GAP基因表达上调对HL-60细胞体内及体外侵袭能力的影响[J]. 中华血液学杂志, 2015, 36(7)
作者姓名:邱婷婷  李德鹏  李振宇  徐开林  祁小飞  岑建农  陈子兴
作者单位:1. 徐州医学院附属医院血液科 221002
2. 徐州医学院附属医院血液科
3. 215006,苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973),国家自然科学基金面上项目,江苏省高校重点学科建设项目,江苏省科教兴卫工程-临床医学中心,江苏省科技厅生命健康专项
摘    要:
目的 探讨上调Rap1 GAP基因表达对白血病细胞株HL-60细胞体外侵袭能力的影响,并构建白血病动物模型验证体外实验的结果.方法 采用实时定量PCR及Western blot法检测已构建的Venus/HL-60细胞(空载体对照组)及Rap1 GAP过表达单克隆细胞株Rap1 GAP/HL-60 (R1、R2)细胞的Rap1GAP表达水平,Transwell方法检测空载体对照组、R1、R2细胞的体外侵袭能力,实时定量PCR检测各组细胞MMP-9 mRNA表达,并通过明胶酶谱法检测MMP-2及MMP-9活性;将4周龄BALB/c裸鼠进行预处理后接种白血病细胞,观察各组裸鼠生存时间及白血病细胞在其脏器中的浸润情况.结果 R1、R2细胞的Rap1GAP表达水平分别为空载体对照组的16.2、17.3倍,侵袭率分别为(55±5)%、(59±4)%,显著高于空载体对照组的(14±4)%(P值均<0.001).R1和R2细胞的MMP-9 mRNA表达水平增加,约为空载体对照组的12.0倍.动物模型实验结果显示接种R1细胞裸鼠(R1组)生存时间为(32.00±1.85)d,R2组为(33.37±2.50)d,空载体对照组为(43.62±2.32)d,R1组和R2组裸鼠生存时间较空载体对照组缩短(P<0.05).R1组和R2组共有3只裸鼠出现脑膜组织浸润,脑膜组织扩增出Rap1GAP和MMP-9基因,空载体对照组裸鼠各脏器白血病细胞浸润不明显.结论 Rap1GAP增强HL-60细胞侵袭能力,同时伴随MMP-9 mRNA表达水平升高,裸鼠体内实验亦证实Rap1GAP提高了HL-60细胞体内侵袭力.

关 键 词:HL-60细胞  基因,Rap1GAP  白血病浸润  基质金属蛋白酶类

The effect of up-regulated expression of Rap1GAP on the invasion ability of HL-60 cells in vitro and in vivo
Qiu Tingting,Li Depeng,Li Zhenyu,Xu Kailin,Qi Xiaofei,Cen Jiannong,Chen Zixing. The effect of up-regulated expression of Rap1GAP on the invasion ability of HL-60 cells in vitro and in vivo[J]. Chinese Journal of Hematology, 2015, 36(7)
Authors:Qiu Tingting  Li Depeng  Li Zhenyu  Xu Kailin  Qi Xiaofei  Cen Jiannong  Chen Zixing
Abstract:
Keywords:HL-60 cells  Gene,Rap1GAP  Leukemic infiltration  Matrix metalloproteinases
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