siRNA沉默YKL-40对支气管哮喘小鼠气道平滑肌增殖及迁移的影响

目的探讨小干扰核糖核酸（siRNA）沉默人软骨糖蛋白39（YKL-40）对支气管哮喘小鼠气道平滑肌增殖及迁移的影响。方法20 只健康雌性BALB/c 小鼠随机分为健康组（ n=10）和哮喘组（n =10），采取腹腔注射抗原和雾化吸入卵蛋的方式复制哮喘模型，健康组小鼠处理与哮喘组相同，只是将致敏物换成生理盐水，留取气管和支气管进行细胞培养，两组小鼠气道壁平滑肌细胞根据转染物不同分为siRNA-YKL-40 组、阴性对照组和空白对照组，MTT法检测不同转染组小鼠气道壁平滑肌细胞增殖情况，Transwell 法检测不同转染组小鼠气道壁平滑肌细胞迁移能力，实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测不同转染组小鼠气道壁平滑肌细胞中YKL-40、白细胞介素4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）基因和蛋白表达。结果哮喘组中siRNA-YKL-40组48～96h时细胞吸光度A值均低于阴性对照组和空白对照组，哮喘组中siRNA-YKL-40 组、阴性对照组和空白对照组48～96 h 时细胞吸光度A 值均高于健康组，差异有统计学意义（p <0.05）；哮喘组中siRNA-YKL-40 组迁移细胞数（86.38±8.61）个，低于阴性对照组和空白对照组，哮喘组迁移细胞数均高于健康组，差异有统计学意义（p<0.05）；哮喘组和健康组中siRNA-YKL-40 组-40 基因和蛋白相对表达量均低于阴性对照组和空白对照组（ p<0.05），哮喘组中siRNA-YKL-40 组-4 基因和蛋白相对表达量均低于阴性对照组和空白对照组，而-γ基因和蛋白相对表达量与IFN-γ/IL-4均高于阴性对照组和空白对照组（p <0.05），与健康组比较，哮喘组中siRNA-YKL-40 组、阴性对照组和空白对照组-4 基因和蛋白相对表达量均升高，而- 基因和蛋白相对表达量和IFN-γ/IL-4均降低，差异有统计学意义（p <0.05）。结论靶向-40 基因沉默能抑制气道壁平滑肌细胞增殖及迁移，可能与调节IL-4/IFN-γ失衡状态而减少气道炎症反应有关。

Effect of silencing YKL-40 by siRNA on proliferation and migration of airway smooth muscle cells in asthmatic mice