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利用反向遗传学技术构建H5N9重组流感病毒株
引用本文:郭磊,宁若彤,王晶晶,郑惠文,李嘉祺,范海涛,李洪哲,杨泽宁,刘龙丁.利用反向遗传学技术构建H5N9重组流感病毒株[J].国际病毒学杂志,2017,24(3).
作者姓名:郭磊  宁若彤  王晶晶  郑惠文  李嘉祺  范海涛  李洪哲  杨泽宁  刘龙丁
作者单位:1. 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所,昆明,650031;2. 650031昆明,中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所;昆明医科大学
基金项目:云南省应用基础研究计划面上项目,中国医学科学院创新工程项目
摘    要:目的 利用反向遗传学技术构建来源人感染禽流感病毒H5N1和H7N9 HA和NA基因的H5N9亚型禽流感病毒.方法 全基因合成A/Beijing/01/2003(H5N1)禽流感病毒HA基因片段和A/Zhejiang/DTID-ZJU10/2013(H7N9)禽流感病毒NA基因片段,插入到pHW2000载体,与携带有A/Puerto Rico/8/34(H1N1)的6个内部基因的pHW2000重组质粒一起转染293T和MDCK混合细胞,拯救H5N9重组病毒.结果 核酸测序、HA和NA基因转录和表达检测、细胞病变分析确定利用该反向遗传学系统可以成功拯救H5N9病毒.重组H5N9病毒在MDCK细胞上复制增殖能力低于相同方法拯救H1N1病毒.结论 利用反向遗传学技术成功构建一株H5N9重组病毒.

关 键 词:反向遗传技术  甲型流感病毒  H5N9

Construction of a recombinant influenza A H5N9 virus using reverse genetics system
Guo Lei,Ning Ruotong,Wang Jingjing,Zheng Huiwen,Li Jiaqi,Fan Haitao,Li Hongzhe,Yang Zening,Liu Longding.Construction of a recombinant influenza A H5N9 virus using reverse genetics system[J].International Journal of Virology,2017,24(3).
Authors:Guo Lei  Ning Ruotong  Wang Jingjing  Zheng Huiwen  Li Jiaqi  Fan Haitao  Li Hongzhe  Yang Zening  Liu Longding
Abstract:
Keywords:Reverse genetic system  Influenza A virus  H5N9
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