肺腺癌细胞P15中凋亡相关基因甲基化状态与化疗敏感性的关系

目的:研究肺腺癌细胞P15中凋亡相关基因甲基化状态与化疗敏感性的关系。方法:采用甲基化特异性PCR法检测未处理对照组和地西他滨(DAC)处理组P15细胞的p73、p14ARF、p16INK4a和bax基因甲基化情况,利用RT-PCR检测p73、bcl-xL、bad、bax、p14ARF和p16INK4a的mRNA表达;采用平板克隆形成实验和细胞生长抑制实验检测DAC处理前后P15细胞对顺铂(C-DDP)的敏感性,DAPI染色法检测DAC处理前后C-DDP对P15细胞的凋亡情况。结果:p73、p16INK4a和bax在甲基化状态下均有表达,经DAC处理后p16INK4a表达减弱,p73和bax表达消失。p73、p16INK4a和bax在非甲基化状态下表达较弱,经DAC处理后三者均表达增强。DAC加C-DDP处理组与未处理对照组相比,前者的克隆形成率和细胞生存显著下降(P<0.05)。DAC加C-DDP组的细胞凋亡显著高于未处理对照组(P<0.05)。结论:由于DAC活化多个因甲基化而表达沉默的促凋亡基因,用DAC处理肺腺癌细胞P15后,P15细胞对化疗药物C-DDP的敏感性增强。DAC和C-DDP协同作用促进了肿瘤细胞的凋亡。DAC与C-DDP联合应用可逆转化疗耐药,恢复肺腺癌细胞对化疗药物的敏感性,两者具有明显的协同抗肿瘤作用。