| 幽门螺杆菌HpaA减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗的构建及免疫原性检测 |
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| 引用本文： | 徐灿,李兆申,屠振兴,杜奕奇,孙波,杨哗,龚燕芳,金晶,许国铭. 幽门螺杆菌HpaA减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗的构建及免疫原性检测[J]. 解放军医学杂志, 2004, 29(8): 667-669,673 |
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| 作者姓名： | 徐灿 李兆申 屠振兴 杜奕奇 孙波 杨哗 龚燕芳 金晶 许国铭 |
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| 作者单位： | 第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学长海医院,上海,200433;第二军医大学长海医院,上海,200433 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (编号 30 1 70 4 2 7)资助课题 |
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| 摘 要： | 目的 构建含幽门螺杆菌(H．pylori)hpaA基因的重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗。方法 应用PCR方法从H．pylori标准菌株基因组DNA中扩增hpaA基因，克隆入pUCmT载体，检测hpaA基因序列，经过酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体pIRES，转入大肠杆菌，筛选阳性克隆，通过PCR和酶切反应鉴定。重组载体pIRESrhpaA转化入减毒鼠伤寒沙门菌LBS000，抽提质粒，再转化入SL7207，反复传代，鉴定重组核酸疫苗菌的稳定性。重组载体pIRES-hpaA通过脂质体法转染CCXS-7细胞，SDS-PAGE及Western印迹法检测pIRES-hpaA表达HpaA蛋白的免疫原性。结果 成功扩增出长约750bp的hpaA基因，测序结果表明扩增出的hpaA基因与H．pylorihpaA序列一致，PCR和酶切鉴定结果证实hpaA基因克隆入真核表达载体pIRES，成功构建了含hpaA基因的幽门螺杆菌核酸疫苗pIRES-hpaA，并成功构建了幽门螺杆菌hpaA基因的减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗，重组核酸疫苗稳定，Western印迹法检测到了特异性的蛋白条带。结论 构建了具有免疫反应性的H．pylori hpaA减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗，为进一步探索其免疫作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 疫苗 载体 鼠伤寒沙门菌 |
Construction of a recombinant attenuated Salmonella typhimurium nucliec acid vaccine carrying Helicobacter pylori HpaA and detecton of its immunogenicity |
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| Xu Can,Li Zhaoshen,Tu Zhenxing et al. Construction of a recombinant attenuated Salmonella typhimurium nucliec acid vaccine carrying Helicobacter pylori HpaA and detecton of its immunogenicity[J]. Medical Journal of Chinese People's Liberation Army, 2004, 29(8): 667-669,673 |
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| Authors: | Xu Can Li Zhaoshen Tu Zhenxing et al |
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| Affiliation: | Xu Can,Li Zhaoshen,Tu Zhenxing et al . Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shanghai 200433,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori vaccine vector Salmonella typhimurium |
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