应用套式PCR早期快速诊断麻疹的研究

目的 建立从临床标本中快速检测麻疹病毒(MV)基因片段的方法,以便早期快速地对临床症状不典型的麻疹作出诊断。方法 收集116例疑似麻疹患儿的咽拭子标本,74例尿液标本及110例血清标本,其中73名疑似麻疹患儿同时收集了咽拭子标本与尿液标本,104名疑似麻疹患儿同时收集了咽拭子标本与血清标本。采用套式PCR扩增咽拭子和尿液标本中的MVN基因相关片段,用MV标准株进行空斑形成试验测定其敏感性,通过与常见呼吸道病毒PCR交叉扩增试验测定方法的特异性。用ELISA检测患儿血清中的MV特异性IgM抗体。结果 套式PCR可检测到0.53空斑形成单位(pfu)的病毒。所设计的引物与其他病毒株均无交叉反应。临床疑似麻疹患儿咽拭子和尿液标本中MV检测阳性率分别为60.3％(70/116)和64.9％(48/74);在同时采集到咽拭子和尿液标本的73例患儿中,检测结果一致的有71例(97.3％)。用2种ELISA试剂盒测定麻疹特异性IgM阳性率分别为59.1％(65/110)和55.5％(61/110),检测结果一致的106例(96.4％)。在同时采集到咽拭子和血液标本的104例患儿中麻疹基因检测与抗体检测结果一致的84例(80.8％)。结论 本研究建立的套式PCR检测MVN基因的方法有较好的敏感性和特异性,与血清中MV特异性IgM检测方法相比,基因检测可在临床症状出现后就检测到,并可以单份标本就进行检测,更适合作麻疹早期诊断的实验室检查依据。

Evaluation of early and rapid etiological diagnosis of measles by detection of measles virus RNA using nested RT-PCR