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SASH1通过MAP2K2和MAP4K4与ERK信号通路交互作用
引用本文:王晶,贺勇,张继旺,廖娟,曾家伟,周定安. SASH1通过MAP2K2和MAP4K4与ERK信号通路交互作用[J]. 基础医学与临床, 2014, 34(11)
作者姓名:王晶  贺勇  张继旺  廖娟  曾家伟  周定安
作者单位:1. 重庆医科大学附属永川医院检验科,重庆,402160
2. 重庆医科大学附属永川医院中心实验室,重庆,402160
3. 都江堰市人民医院检验科,都江堰,611830
基金项目:重庆医科大学附属永川医院院内课题
摘    要:目的 探讨新候选抑癌基因SASH1与细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的两个关键分子MAP2K2和MAP4K4的蛋白-蛋白相互作用关系.方法 用Xho Ⅰ和HpaⅠ构建SBP-Flag-SASH1-pBABE-puro反转录病毒载体,转染HEK-293T细胞,通过嘌呤霉素筛选出稳定表达外源性SASH1基因的细胞系.Western blot检测外源性Flag-SASH1蛋白表达,利用pull-down实验、质谱技术、免疫沉淀鉴定和分析与SASH1结合的并可能调节细胞增殖、转移和凋亡等的关键蛋白.用SASH1-siRNA1和SASH1-siRNA2分别转染MDA-MB-231细胞系,以空白组和Negative-siRNA组为对照.72 h后Western blot检测SASH1的干扰效果和P-ERK1/2水平.结果 成功构建稳定表达SBP-Flag-SASH1-pBABE-puro重组质粒的HEK-293T细胞系,SASH1与MAP2K2和MAP4K4结合并发生相互作用.SASH1-siRNA有效抑制MDA-MB-231细胞SASH1蛋白表达(P<0.05),且P-ERK1/2在SASH1抑制组表达增加.结论 MAP2K2和MAP4K4是SASH1的重要的候选结合蛋白,SASH1可能通过与其直接或间接结合串话ERK信号传导通路,进而调节细胞增殖和迁移等细胞生物学功能.

关 键 词:SASH1基因  胞外信号调节激酶  MAP2K2  MAP4K4

SASH1 may interact with ERK signaling pathways through MAP2K2 and MAP4K4
WANG Jing,HE Yong,ZHANG Ji-wang,LIAO Juan,ZENG Jia-wei,ZHOU Ding-an. SASH1 may interact with ERK signaling pathways through MAP2K2 and MAP4K4[J]. Basic Medical Sciences and Clinics, 2014, 34(11)
Authors:WANG Jing  HE Yong  ZHANG Ji-wang  LIAO Juan  ZENG Jia-wei  ZHOU Ding-an
Abstract:
Keywords:SASH1 gene  extracellular regulated protein kinase  mitogen-activated protein kinase kinase 2  mitogen-activated protein kinase kinase kinase kinase 4
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