Determination of Sex Hormone-binding Globulin in Human Semen by Selective Ammonium Sulphate Precipitation*

Summary: A simple method was developed to measure the SHBG capacities of human serum, semen and sperm cells. After suitable dilution, disintegration and addition of labelled dihydrotestosterone-1,2-³H or testosterone-1,2-³H, the SHBG was precipitated by the addition of saturated ammonium sulphate in a final concentration of 42.3%. The precipitate was centrifuged and the activity of the non-bound, labelled steroid was counted in an aliquot of the supernatant. Subtraction of this result from the total activity yielded the SHBG-bound steroid in μg/100 ml or nmol/1. Examination of 52 males gave normal values of x? = 13.91 nmol/1 (S.E.M. = 0,746) di-hydrotestosterone binding globulin (DHTBG) and x? = 11.67 nmol/1 (S.E.M. = 0.555) testosterone binding globulin (TBG) in serum, while the concentrations in the seminal plasma were x? = 10.89 nmol/1 (S.E.M. = 0,723) DHTBG and x? = 8.93 nmol/1 (S.E.M. = 0.625) TBG. x? = 5.57 ng/mg protein (S.E.M. = 0.516) DHTBG and x? = 4.91 ng/mg protein (S.E.M. = 0.440) TBG were found in the disintegrated sperm cells. Zusammenfassung: Bestimmung des sexualhormonbindenden Globulins (SHBG) in Humanejakulat durch selektive Ammoniumsulfat-Ausfällung Zur Messung der SHBG-Kapazität in Humanserum, -ejakulat und Spermatozoen wurde eine einfache Methode entwickelt. Nach entsprechender Verdünnung, Aufschlüsselung und Zugabe von markiertem Dihydrotestosteron-1,2-³H oder Test osteron-1, 2-³H wurde das SHBG durch Zugabe von gesättigter Ammoniumsulfatlösung in einer Endkonzentration von 42,3% ausgefällt. Der Niederschlag wurde zentrifugiert und die Aktivität des nichtgebundenen markierten Steroids in der separierten Flüssigkeit gemessen. Die Subtraktion dieses Wertes von der Totalaktivität ergab den SHBG-gebundenen Steroidwert in μg/100 ml oder umgerechnet in nmol/1. Die Untersuchung von 52 Männern ergaben Normalwerte von x? = 13,91 nmol/1 (S.E.M. = 0,746) des dihydrotestosteronbindenden Globulins (DHTBG) und x? = 11,67 nmol/1 (S.E.M. = 0,555) des testosteronbindenden Globulins (TBG) im Serum während die Konzentrationen im Ejakulatplasma x? = 10.89 nmol/1 (S.E.M. = 0,723) DHTBG und x? = 8,93 nmol/1 (S.E.M. = 0,625) TBG waren. x? = 5,57 ng/mg Protein (S.E.M. = 0,516) DHTBG und x? = 4,91 ng/mg Protein (S.E.M. = 0,440) TBG wurden in desintegrierten Spermatozoen gefunden.