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细胞因子预处理对体外扩增NK 细胞活性的影响
引用本文:申重阳,幸倚帆,谭小虎,陈勇军. 细胞因子预处理对体外扩增NK 细胞活性的影响[J]. 中国现代医学杂志, 2018, 28(28): 33-38
作者姓名:申重阳  幸倚帆  谭小虎  陈勇军
作者单位:(1. 成都中医药大学 基础医学院,四川 成都 611137 ;2. 成都康景生物科技有限公司,四川 成都 611130)
基金项目:国家自然科学基金(No :81603478);成都中医药大学校基金(No :ZRQN1612)
摘    要:
目的 采集健康志愿者和肿瘤患者的外周血单个核细胞(PBMCs)进行自然杀伤细胞(NK)的扩增培养,培养过程中白细胞介素IL-2、IL-12、IL-15、IL-18 以不同组合及不同方式添加,探究体外培养NK 细胞的细胞因子最佳组合和添加方式。方法 根据细胞因子组合及添加方式的不同,将NK 培养分为3 组。A 组:IL-2+IL-15 组,B 组:IL-2+IL-12+IL-15+IL-18 组,C 组:IL-12+IL-15+IL-18 预处理/IL-2 组。培养过程中第7 天和第14 天分别取样统计各组细胞因子培养后的细胞数量,并使用流式细胞仪检测NK 细胞表面分子表达;将NK 细胞与K562 细胞共培养,然后ELISA 测定NK 细胞的IFNγ 释放量,CSFE/7-AAD 法检测NK 细胞的杀伤活性。结果 3 组不同的培养方式所得细胞的扩增倍数差异无统计学意义,随着培养时间的增加,NK细胞的比例也逐渐上升,3组间NK细胞比例差异无统计学意义(P >0.05)。NK细胞表面CD25(IL-2Rα)的表达情况比较,差异有统计学意义(P <0.05),C 组的阳性率高于A 和B 组。IFN-γ 的释放量和NK 细胞的体外杀伤活性一致,均为C 组高于A 和B 组。对肿瘤患者的NK 细胞,C 组的细胞因子添加方式也能很好的进行扩增(CD3-CD56+ 细胞比例大于50%)。结论 C 组中的细胞因子预处理方式能够高效扩增NK 细胞,与A或B 组联合添加的方式比较,该方式能显著激活NK 细胞的杀伤活性。

关 键 词:外周血单个核细胞;自然杀伤细胞;细胞因子预处理
收稿时间:2018-03-25

Pretreatment with cytokines promotes cytotoxic activity of NK cells
Chong-yang Shen,Yi-fan Xing,Xiao-hu Tan,Yong-jun Chen. Pretreatment with cytokines promotes cytotoxic activity of NK cells[J]. China Journal of Modern Medicine, 2018, 28(28): 33-38
Authors:Chong-yang Shen  Yi-fan Xing  Xiao-hu Tan  Yong-jun Chen
Affiliation:(1. School of Basic Medical Sciences, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu,Sichuan 611137, China; 2. Chengdu Konjin Co., Ltd, Chengdu, Sichuan 611130, China)
Abstract:
Keywords:PBMCs   natural killer cell   cytokine pretreatment
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