| 摘 要： | 目的探讨沉默PARP-1对1,4-苯醌(PBQ)致大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)凋亡的影响。方法以空载体BMSCs为对照组,以PARP-1沉默BMSCs为处理组,免疫印迹法检测聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)-1蛋白表达量。磷酸盐缓冲液(PBS)溶解PBQ,分别以0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0和320.0μmol/L PBQ染毒两组细胞,根据细胞活力检测结果选择合适染毒浓度后,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,Annexin V-PE/7-AAD标记的流式细胞技术检测细胞凋亡,实时荧光定量-聚合酶链反应检测两组细胞PARP-1基因表达。结果沉默细胞PARP-1蛋白表达量〔(0.15±0.02)倍〕与对照组细胞〔(1.00±0.03)倍〕相比,下降了85%(P<0.05)。PBQ染毒24 h后,相同剂量下两组细胞的活力并无显著性差异。随着PBQ染毒剂量增加,两组细胞PARP-1表达水平和凋亡率均明显增高(P<0.05),且相同剂量下PARP-1沉默细胞比对照组细胞凋亡率明显增高(P<0.05)。结论 PARP-1沉默BMSCs在PBQ作用下更易发生凋亡,PARP-1可能参与了PBQ诱导的细胞凋亡。
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