| CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶原核表达条件的研究 |
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| 引用本文： | 徐韫健,李翊泉,廖伟娇,江洁华,张东梅.CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶原核表达条件的研究[J].热带医学杂志,2010,10(2). |
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| 作者姓名： | 徐韫健 李翊泉 廖伟娇 江洁华 张东梅 |
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| 作者单位： | 1. 广州医学院第一附属医院检验科,广州,510120
2. 广州医学院第一附属医院输血科,广州,510120 |
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| 基金项目： | 广州市医药卫生科技项目，广州市医药卫生科技项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨重组质粒pET-28a(+)/CTX-M-3分别在大肠埃希菌ER2566和BL21(DE3)中进行原核表达的最佳条件.方法 分别在不同的宿主菌、诱导温度、诱导时间和诱导剂浓度中诱导pET-28a(+)/CTX-M-3融合表达载体,目的 产物经SDS-PAGE和BandScan凝胶分析软件分析,以获得最佳表达条件.结果 表达载体的最佳诱导条件是重组质粒在BL21(DE3)中18℃诱导24 h,IPTG终浓度为0.8 mmol/L:表达载体在最佳条件下表达时,目的 蛋白的最高表达量占菌体总蛋白的33%.结论 获得pET-28a(+)/CTX-M-3在大肠埃希菌中表达CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamase,ESBLs)蛋白的最佳条件,为此酶的大量纯化奠定了基础.
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| 关 键 词： | 超广谱β-内酰胺酶 原核表达 条件 |
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