| Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达鼠IL-2蛋白的研究 |
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| 引用本文： | 黄大林,戴支凯,王鑫,李彬彬,钟江.Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达鼠IL-2蛋白的研究[J].天津医药,2011,39(2):145-148. |
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| 作者姓名： | 黄大林 戴支凯 王鑫 李彬彬 钟江 |
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| 作者单位： | 1. 桂林医学院微生物学与免疫学教研室,广西,541004
2. 复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系 |
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| 基金项目： | 国家科技攻关863资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达重组鼠白细胞介素(IL)-2蛋白。方法:用Flag标记鼠IL-2并加入真核细胞启动子CMV,构建重组质粒pFB-CMV-IL-2并予酶切和PCR鉴定;将鼠IL-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacDual中,将pFB-CMV-IL-2转化到含杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态菌中,筛选阳性克隆,获得重组杆状病毒载体Bacmid-pFB-CMV-IL-2,抽提质粒;用脂质体转染法将Bacmid-pFB-CMV-IL-2转染Sf9昆虫细胞包装病毒,收获重组杆状病毒,将构建病毒转导BHK细胞培养,用Western blot检测IL-2蛋白。结果:通过杆状病毒表达系统,在BHK细胞成功表达重组的鼠IL-2蛋白。结论:重组杆状病毒在真核细胞中成功表达重组鼠IL-2蛋白。
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| 关 键 词： | 白细胞介素2 重组蛋白质类 杆状病毒科 遗传载体 质粒 聚合酶链反应 小鼠 近交系 |
Bac-to-Bac Baculovirus Expression System in IL-2 Protein of BHK |
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| HUANG Dalin,DAI Zhikai,WANG Xin,LI Binbin,ZHONG Jiang.Bac-to-Bac Baculovirus Expression System in IL-2 Protein of BHK[J].Tianjin Medical Journal,2011,39(2):145-148. |
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| Authors: | HUANG Dalin DAI Zhikai WANG Xin LI Binbin ZHONG Jiang |
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| Institution: | HUANG Dalin,DAI Zhikai,WANG Xin,LI Binbin,ZHONG JiangGuilin Medical University,Guangxi 541004,China |
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| Abstract: | Objective:To construct recombinant mouse IL-2 protein in BHK cells using Bac-to-Bac baculovirus expression system.Methods:The mouse IL-2 was marked by Flag,and joined the eukaryotic cell promoter CMV.The plasmid pFB-CMV-IL-2 was constructed to recombinant,restriction enzyme was used to digest,and was amplified by PCR.The mouse IL-2 was cloned into the baculovirus expression vector pFastBacDual and pFB-CMV-IL-2 was transformed into baculovirus shuttle vector containing the DH10Bac competent bacmid bacteria.T... |
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| Keywords: | interleukin-2 recombinant proteins baculoviridae genetic vectors plasmids polymerase chain reaction mice inbred strains |
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