| hTEFT重组绿色荧光表达载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 李一冬,赵国新,曹明瑞. hTEFT重组绿色荧光表达载体的构建与表达[J]. 中国现代医学杂志, 2008, 18(2): 171-173 |
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| 作者姓名： | 李一冬 赵国新 曹明瑞 |
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| 作者单位： | 1. 郑州大学第一临床医学院,妇产科,河南,郑州,450052
2. 河南省医学科学研究所免疫室,河南,郑州,450052 |
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| 摘 要： | 目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的真核表达质粒。方法用RT-PCR方法从肝癌组织中提取总RNA扩增出hTERT基因片段,将其连接pGEM-TEasy质粒上,将重组质粒pGEM-T-hTERT和pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体同时用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后进行连接,再将重组的pEGFP-C3-hTERT基因片段转染NIH3T3细胞,经G418筛选获得稳定转染的细胞系,荧光倒置显微镜观察并检测转染细胞的hTERTmRNA表达水平。结果DNA序列分析证实了重组载体pGEM-T-hTERT和pEGFP-C3-hTERT内插入片段的碱基组成与公开发表的hTERT序列一致。转染pEGFP-C3-hTERT的NIH3T3细胞可见绿色荧光,并检出高水平表达的hTERT。结论成功构建高效表达hTERT的真核表达载体,为以hTERT为靶点的肿瘤治疗打下实验基础。
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| 关 键 词： | hTERT 绿色荧光表达载体 真核表达 重组载体 绿色荧光 真核表达载体 构建与表达 expression vector hTERT 实验基础 肿瘤治疗 靶点 高效表达 高水平表达 序列分析 开发 碱基组成 插入片段 结果 表达水平 mRNA 转染细胞 检测 |
| 文章编号： | 1005-8982（2008）02-0171-03 |
| 收稿时间： | 2007-08-21 |
| 修稿时间： | 2007-08-21 |
Construction and expression of hTERT in eucaryotic expression vector |
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| LI Yi-dong,ZHAO Guo-xin,CA Ming-rui. Construction and expression of hTERT in eucaryotic expression vector[J]. China Journal of Modern Medicine, 2008, 18(2): 171-173 |
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| Authors: | LI Yi-dong ZHAO Guo-xin CA Ming-rui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hTERT pEGFP-C3 eukaryotic expression |
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