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华支睾吸虫乳酸脱氢酶E10-20及E94-102表位的克隆表达与生物学特性初步研究
引用本文:黄灿,王乐旬,胡旭初,余新炳,黄艳,邓传欢,徐劲. 华支睾吸虫乳酸脱氢酶E10-20及E94-102表位的克隆表达与生物学特性初步研究[J]. 中山大学学报(医学科学版), 2010, 31(4): 486-490
作者姓名:黄灿  王乐旬  胡旭初  余新炳  黄艳  邓传欢  徐劲
作者单位:中山大学中山医学院寄生虫教研室, 广东 广州 510080
基金项目:广东省自然科学基金,广东省医学科研基金 
摘    要:
【目的】 原核克隆及表达华支睾吸虫乳酸脱氢酶(CsLDH)两个表位aa10-20(E10-20)及aa94-102(E94-102),初步研究两表位与CsLDH免疫学及酶学相互关系。【方法】 将E10-20及E94-102克隆至pGEX-4T-1载体,表达纯化重组蛋白,用Western Blotting和间接ELISA法检测CsLDH免疫血清对表位重组蛋白的识别,同时检测两表位重组蛋白的免疫血清对CsLDH蛋白的识别;利用CsLDH标准酶活性反应体系,比较两表位免疫血清与CsLDH免疫血清对CsLDH催化丙酮酸还原成乳酸反应的影响。【结果】 成功构建pGEX-4T-1-E10-20及pGEX-4T-1-E94-102重组质粒,SDS-PAGE鉴定表达的重组蛋白,菌体裂解液经亲和层析纯化,获得与GST融合表达的蛋白E10-20及E94-102。两表位重组蛋白均可被CsLDH免疫血清识别,而对E94-102更易于识别;重组CsLDH也能被E10-20及E94-102免疫血清识别,而不能被对照血清识别。E94-102免疫血清能抑制CsLDH催化丙酮酸还原成乳酸的反应。【结论】 表位结构和功能研究深化了对CsLDH结构的理解,并为开辟CsLDH疫苗研究新路径奠定基础。

关 键 词:华支睾吸虫  乳酸脱氢酶  表位  
收稿时间:2010-01-07;

Clone, Expression, and Characterization of Two Epitopes E10-20 and E94-102 of Lactate Dehydrogenase from Clonorchis sinensis
HUANG Can,WANG Le-xun,HU Xu-chu,YU Xin-bing,HUANG Yan,DENG Chuan-huan,XU Jin. Clone, Expression, and Characterization of Two Epitopes E10-20 and E94-102 of Lactate Dehydrogenase from Clonorchis sinensis[J]. Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences), 2010, 31(4): 486-490
Authors:HUANG Can  WANG Le-xun  HU Xu-chu  YU Xin-bing  HUANG Yan  DENG Chuan-huan  XU Jin
Abstract:
Keywords:
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