诱导人卵黄囊间质干细胞向成骨细胞及神经细胞定向分化

目的：分离纯化及体外定向诱导人卵黄囊间质干细胞(hYS-MSC)分化为成骨细胞及神经细胞。方法：卵黄囊细胞经贴壁培养、传代纯化得到hYS-MSC,检测其表面抗原表达、对其进行核型分析、细胞周期检测并测定AKP活性;采用地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C作成骨诱导剂、β-巯基乙醇或复方丹参注射液作为神经诱导剂诱导hYS-MSC向成骨细胞及神经细胞定向分化。组织化学方法作成骨检测;免疫组化方法检测NSE、NF及GFAP在经神经诱导hYS-MSC中的表达。结果：hYS-MSC易于纯化,在培养过程中保持正常核型,具有较大增殖能力。hYS-MSCCD29、CD44、CD166及CD105表达阳性,CD34、CD45和CD86为阴性;AKP弱阳性。hYS-MSC经成骨诱导AKP强阳性,诱导两周后形成钙盐沉积形成的矿化区。hYS-MSC经神经诱导可见NSE、NF或GFAP阳性细胞,符合神经元及胶质细胞的生物学特征。结论：hYS-MSC在体外培养过程中具有较大增殖能力并保持正常核型,与成体MSC表型一致,在体外可以诱导分化为成骨细胞、神经元及胶质细胞。