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| 用噬菌体抗体库分离NK细胞抑制受体特异性的ScFv片段 | |
| 引用本文： | 乔旭刚,汪明春,Andreas Ziegler. 用噬菌体抗体库分离NK细胞抑制受体特异性的ScFv片段[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 1999, 19(2) |
| 作者姓名： | 乔旭刚 汪明春 Andreas Ziegler |
| 作者单位： | 1. 510632,广州,暨南大学医学院血液病研究室 2. 深圳红十字会医院血液科 3. Immungenetik,Universitalinkum Charit'e,Humbald-Universit(a)t,Berlin |
| 摘 要： | 目的探讨从噬菌体抗体库分离杀伤细胞抑制受体（ＫＩＲｓ）特异性ＳｃＦｖ（ｓｉｎｇｌｅｃｈａｉｎＦｖ）的可行性及其特征。方法所用ＫＩＲ为ＮＫＡＴ２，其可溶性形式为ＮＫＡＴ２－ＩｇＧ１。噬菌体抗体库为Ｎｉｓｓｉｍ等报道的半合成抗体库。抗体库经包被免疫管的ＮＫＡＴ２－ＩｇＧ１５次筛选后，可溶性ＳｃＦｖ由ＩＰＴＧ诱导细菌而获得，筛选效果由测定噬菌体的菌落形成单位及ＤＮＡ酶切图谱分析。ＥＬＩＳＡ、聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹分析ＳｃＦｖ特异性及免疫学特征，并进行ＤＮＡ的序列测定。结果５次筛选后，噬菌体得到２００倍的富集，酶切图谱也显示某种构型噬菌体的富集。４０个克隆的细菌上清经测试，３７个显示与ＮＫＡＴ２有较强的反应。ＳｃＦｖ经聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹显示相对分子质量为３０×１０３，其ＤＮＡ序列完全相同，重链ＣＤＲ３区编码氨基酸为ＥＳＮＬＶＴＣ，重链其它部分与ＤＰ３５一致。结论研究初步结果表明，用噬菌体抗体库可以快速、简便地产生用于ＫＩＲ研究的较高特异性的试剂。 |
| 关 键 词： | 杀伤细胞抑制受体 噬菌体 DNA.单链 |
Isolation of ScFv fragment specific for human NK cell inhibitory receptor from the phage display library |
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| QIAO Xugang,WANG Mingchun,Andreas Ziegler,Barbara Uchanska-Ziegler. Isolation of ScFv fragment specific for human NK cell inhibitory receptor from the phage display library[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 1999, 19(2) | |
| Authors: | QIAO Xugang WANG Mingchun Andreas Ziegler Barbara Uchanska-Ziegler |
| Abstract: | |
| Keywords: | Killer cell inhibitory receptor Phage display DNA Single stranded |
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