丹参酮ⅡA聚合物脂质纳米粒制备及脑部药物递送研究

目的 为了改善丹参酮Ⅱ_A（TanⅡ_A）的溶解性、增加脑组织中的药物浓度，制备TanⅡ_A聚合物脂质纳米粒（TanⅡ_APLNs）并进行体外释放、药动学、脑组织分布研究。方法 建立TanⅡ_A含量测定的高效液相色谱（HPLC）法，以纳米制剂的包封率和粒径为指标，优化TanⅡ_A-PLNs的制备工艺，分别优化TanⅡ_A与蛋黄磷脂（Egg-PC）的比例、Egg-PC与聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）的比例、有机相与水相的比例；进行TanⅡ_A-PLNs的处方验证、稳定性考察、体外释放考察。建立TanⅡ_A在血浆和脑匀浆中的液-质联用（LC-MS）检测方法。SPF级雄性SD大鼠6只，随机分为2组，给药前12 h禁食，一组ig 25 mg·kg^-1的TanⅡ_A混悬液，另一组尾iv 5 mg·kg^-1的TanⅡ_A-PLNs溶液，于给药后5、15、30、60、120、240、360、480、720 min眼眶取血约0.5 mL，LC-MS法进行药动学检测。取KM小鼠4只，尾iv DiR标记的TanIIA-PLNs，给药30、60、120、240 min后处死解剖，通过荧光成像观察TanIIA-PLNs在组织中的分布情况。取KM小鼠12只，随机分成4组，给药前12 h禁食，尾iv 2.5 mg·kg^-1的TanⅡ_A-PLNs溶液，于给药后30、60、120、240 min处死小鼠，剥离完整大脑组织，称质量，加入2倍超纯水匀浆，LC-MS法检测TanⅡ_A水平。结果 TanⅡ_A-PLNs的最优处方为TanⅡ_A∶Egg-PC为1∶4、Egg-PC∶PLGA为5∶2、有机分散体系∶水分散体系为1∶15。以Egg-PC/PLGA作为脂质纳米粒的膜材，采用纳米粒沉淀法制备的TanⅡ_A-PLNs的平均粒径为272 nm，Zeta电位为-4.93 mV，包封率为88.2%，载药量为18%。在避光、干燥（室温）的条件下TanIIA-PLNs冻干粉稳定。TanIIA原料药在48 h内释放完全，累积释放率为（93.75±0.75）%，与Korsmeyer-Peppas释放方程拟合程度较好； TanIIAPLNs在400 h左右释放完全，累积释放率为（89.44±2.22）%，与零级释放方程拟合度最好。药动学结果表明，大鼠尾iv TanⅡ_A-PLNs给药剂量是ig TanⅡ_A原料药剂量的1/5，TanⅡ_A-PLNs的AUC_0-t和t_1/2ß是TanⅡ_A原料药的2.8和1.5倍。组织分布实验结果显示，30 min时肝组织显示荧光； 60 min时脑组织显示出荧光，120 min时脑组织荧光最强，240 min时脑组织荧光变弱。TanⅡ_A-PLNs给药2 h后，TanⅡ_A脑匀浆质量浓度为235.5 ng·g^-1。结论 制备的TanⅡ_A-PLNs均一稳定，包封率较高，聚合物脂质纳米颗粒的应用提高了TanⅡ_A的血药浓度，可增加药物在脑部的暴露。