地衣芽孢杆菌活菌制剂芽孢数的快速检测方法研究

目的：利用高效液相色谱（HPLC）建立地衣芽孢杆菌活菌制剂中芽孢数的快速检测方法。 方法：采用HPLC,以Waters Xbridge C18为色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm）、0.1%磷酸溶液：甲醇（92:8）为流动相等度洗脱、检测波长273nm、柱温30℃、流速0.8mL·min-1,建立地衣芽孢杆菌中2,6-吡啶二羧酸（DPA）含量的测定方法。以平板计数法对相应的芽孢悬液中芽孢数量进行统计,建立DPA浓度与芽孢数之间的关系曲线。同时采用上述方法检测3种地衣芽孢杆菌活菌制剂（片剂、胶囊剂和颗粒剂）的芽孢数。 结果：研究表明,所建立的DPA测定方法,检测结果的稳定性、精密度、重复性、加样回收率均良好,DPA线性范围为2.5-80 mg·L-1(r=0.999),平均回收率（n=6）为102.1%;芽孢最终浓度与DPA浓度呈线性关系,芽孢最终浓度线性范围为6.5×108-7.8×109 CFU·mL-1（r=0.993）。采用上述方法同时检测3种地衣芽孢杆菌活菌制剂（片剂、胶囊剂和颗粒剂）的芽孢数,结果无显著性差异。 结论：建立地衣芽孢杆菌活菌制剂中芽孢数的快速检测方法,效果好、简单、快速。