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地衣芽孢杆菌活菌制剂芽孢数的快速检测方法研究
引用本文:董芳华,王银环,李珏,李永泉. 地衣芽孢杆菌活菌制剂芽孢数的快速检测方法研究[J]. 中国现代应用药学, 2020, 37(11): 1333-1337
作者姓名:董芳华  王银环  李珏  李永泉
作者单位:浙江大学药物生物技术研究所;绍兴市市场监督管理局,浙江省食品药品检验研究院,浙江省食品药品检验研究院,浙江大学药物生物技术研究所
基金项目:浙江省药品接触材料质量控制研究重点实验室(2014E10006)
摘    要:
目的:利用高效液相色谱(HPLC)建立地衣芽孢杆菌活菌制剂中芽孢数的快速检测方法。 方法:采用HPLC,以Waters Xbridge C18为色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm)、0.1%磷酸溶液:甲醇(92:8)为流动相等度洗脱、检测波长273nm、柱温30℃、流速0.8mL·min-1,建立地衣芽孢杆菌中2,6-吡啶二羧酸(DPA)含量的测定方法。以平板计数法对相应的芽孢悬液中芽孢数量进行统计,建立DPA浓度与芽孢数之间的关系曲线。同时采用上述方法检测3种地衣芽孢杆菌活菌制剂(片剂、胶囊剂和颗粒剂)的芽孢数。结果:研究表明,所建立的DPA测定方法,检测结果的稳定性、精密度、重复性、加样回收率均良好,DPA线性范围为2.5-80 mg·L-1(r=0.999),平均回收率(n=6)为102.1%;芽孢最终浓度与DPA浓度呈线性关系,芽孢最终浓度线性范围为6.5×108-7.8×109 CFU·mL-1(r=0.993)。采用上述方法同时检测3种地衣芽孢杆菌活菌制剂(片剂、胶囊剂和颗粒剂)的芽孢数,结果无显著性差异。结论:建立地衣芽孢杆菌活菌制剂中芽孢数的快速检测方法,效果好、简单、快速。

关 键 词:地衣芽孢杆菌活菌制剂;高效液相色谱法;芽孢数测定;平板计数法
收稿时间:2019-05-05
修稿时间:2020-06-22

Research on Rapid Detection Method for Spore Counting of Viable Organism Preparation of Bacillus Licheniformis
DONG Fanghu,WANG Yinhuan,LI Jue,LI Yongquan. Research on Rapid Detection Method for Spore Counting of Viable Organism Preparation of Bacillus Licheniformis[J]. The Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy, 2020, 37(11): 1333-1337
Authors:DONG Fanghu  WANG Yinhuan  LI Jue  LI Yongquan
Affiliation:Institute of Pharmaceutical Biotechnology, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China;Market Supervision Administration of Shaoxing Municipality, Shaoxing 312000, China;Zhejiang Institute for Food and Drug Control, Hangzhou 310052, China
Abstract:
Keywords:viable organism preparation of Bacillus licheniformis   HPLC   spore counting   plate counting method
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