深圳市耐多药结核分枝杆菌流行株耐药基因序列分析

目的 了解深圳市耐多药结核分枝杆菌（multidrug-resistantMycobacterium tuberculosis ，MDR-TB）的分子流行病学特征。 方法 参照WHO/IUATLD标准，使用L-J药敏培养基，采用1％比例法药敏试验筛选出敏感株和异烟肼（isoniazid,INH）、利福平（rifampicin, RFP）双耐药临床分离株,通过DNA测序检测深圳地区153株敏感株与132株MDR-TB的INH耐药基因 kat G、inh A、oxy R- ahp C基因间区域及RFP耐药基因 rpo B碱基排列顺序，运用DNASTAR和blastn进行序列分析。 结果 153株敏感株突变率为27.5%（42/153）。132株MDR-TB突变率为98.5%（130/132），其中kat G基因突变率为73.5%（97/132），68.9%（91/132）为 kat G315位突变； inh A基因突变率为18.2%（24/132），11.4%（15/132）为启动子区域突变，未发现 inh A94特异突变株； ahp C基因突变率为16.7%（22/132），10.6%（14/132）为启动子区域突变； rpo B基因81-bp核心区域突变率为93.2%（123/132）。 结论 kat G315、inh A启动子区域、ahp C启动子区域以及 rpo B 81-bp核心区域突变为深圳地区耐多药结核分枝杆菌主要突变类型，与其他国家和地区差异无统计学意义；但深圳地区未见 inh A94突变株。

Analyze the epidemical multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis from Shenzhen by DNA sequencing

Objective To investigate the epidemiologic characteristic of multidrug-resistant（MDR） Mycobacterium tuberculosis（MTB） in Shenzhen. Methods According to the standard of WHO,International Union Against Tuberculosis and Lung Disease（IUATLD）,drug-susceptive and MDR MTB strains were collected by drug susceptibility test（DST） of 1% proportion method.katG,inhA,intergenic region of oxyR-ahpC and 81bp core region of rpoB genes in 153 drug-susceptive strains and 132 MDR strains were analyzed by DNA sequencing. Results 27.5%（42/153）of drug-susceptive strains and 98.5%（130/132）of MDR strains showed gene mutations.Of 132 MDR strains,73.5%（97/132）had katG mutations,and 68.9%（91/132）of katG mutations were at codon 315;18.2%（24/132）had inhA mutations,and none specific mutations were found at codon 94 of inhA;11.4%（15/132）had mutations at inhA-promoter region;16.7%（22/132）had ahpC mutations,10.6%（14/132）had mutations at intergenic region of oxyR-ahpC;93.2%（123/132）had mutations at the 81bp core region of rpoB. Conclusion The codon 315 of katG,promoter region of inhA,ahpC and the 81bp core region of rpoB play predominant roles in MDR-TB in Shenzhen.