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| 重组型半胱天冬酶-3真核表达质粒的构建及其在胰腺癌细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 王炜,秦兆寅,王剑利,刘志国,严律南. 重组型半胱天冬酶-3真核表达质粒的构建及其在胰腺癌细胞中的表达[J]. 中华实验外科杂志, 2002, 19(6): 555-556 |
| 作者姓名： | 王炜 秦兆寅 王剑利 刘志国 严律南 |
| 作者单位： | 1. 四川大学华西医院普外科,610041 2. 710004,西安交通大学附属第二医院普外科 3. 710004,西安交通大学附属第二医院,血液内科 4. 第四军医大学西京医院消化科 5. 四川大学华西医院普外科 |
| 摘 要： | 目的：构建重组型半胱天冬酶 -3（Caspase-3）基因，观察其对胰腺癌细胞的促凋亡活性，寻求胰腺癌基因治疗新靶点。方法：聚合酶链反应（PCR）克隆野生型Caspase-3大、小亚基（LS、SS）；体外重组构建大、小亚基排序颠倒的重组型Caspase-3基因，将其克隆致质粒载体pcDNA3.1( )中，经脂质体瞬时转染入胰腺癌细胞株，逆转录（PT）-PCR检测其表达；倒置显微镜，DNA电泳，流式细胞仪（FCM）检测其凋亡诱导活性。结果：序列分析PCR证实重组型Caspase-3小亚基位于大亚基之前；转染之胰腺癌细胞PT-PCR（反转录可扩增出894bp大小片段。转染32h时见细胞减少，碎片增多，结构破坏和无序；DNA电泳见典型的云梯状条带；流式细胞学出现明显凋亡峰。结论：重组型Caspase-3可诱导胰腺细胞凋亡，可作为胰腺癌基因治疗的目的基因。 |
| 关 键 词： | 重组型半胱天冬酶－3 真核表达质粒 构建 胰腺癌 基因治疗 |
| 修稿时间： | 2002-01-14 |
Construction of recombinant Caspase-3 eukaryotic expression plasmid and its expression mediated by vector pcDNA3.1(+) in pancreatic carcinoma cells |
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| WANG Wei ,QIN Zhaoyin,WANG Jianli,et al.. Construction of recombinant Caspase-3 eukaryotic expression plasmid and its expression mediated by vector pcDNA3.1(+) in pancreatic carcinoma cells[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2002, 19(6): 555-556 | |
| Authors: | WANG Wei QIN Zhaoyin WANG Jianli et al. |
| Affiliation: | WANG Wei *,QIN Zhaoyin,WANG Jianli,et al. *Department of General Surgery,Second Hospital of Xi'an Jiaotong University,Xi'an 710004,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Carcinoma Pancreatic Apoptosis Gene therapy |
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