基于HIF-1α/VEGFA信号通路探讨柴胡桂枝汤对三阴性乳腺癌细胞的影响

目的 基于缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子A（VEGFA）信号通路探讨柴胡桂枝汤对三阴性乳腺癌（TNBC）细胞的影响。方法 建立TNBC移植瘤模型，随机分为模型组，卡培他滨组（0.2 mg·kg^-1），柴胡桂枝汤低、中、高剂量组（10.62、21.23、42.46 g·kg^-1），每组10只，干预21 d。给药结束后，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中HIF-1α mRNA表达情况；免疫组化法（IHC）检测肿瘤组织中HIF-1α、TNF-α、VEGFA的表达水平及CD34染色检测肿瘤内血管生成情况并计算微血管密度（MVD）；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中HIF-1α、VEGFA、表皮生长因子受体（EGFR）蛋白的表达。结果 与模型组比较，卡培他滨组、柴胡桂枝汤低、中、高剂量组TNF-α水平显著降低（P<0.01），HIF-1α mRNA显著降低（P<0.01），HIF-1α、TNF-α、VEGFA和CD34阳性细胞表达及MVD明显降低（P<0.05，P<0.01），HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平显著降低（P<0.01）。与卡培他滨组比较，柴胡桂枝汤中、高剂量组TNF-α水平显著降低（P<0.01），HIF-1α mRNA显著降低（P<0.01），HIF-1α、TNF-α和VEGFA阳性细胞表达显著降低（P<0.01），CD34表达及MVD显著降低（P<0.01），HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平均显著降低（P<0.01）。结论 柴胡桂枝汤可能通过调控HIF-1α/ VEGFA信号通路，抑制TNBC细胞血管生成，从而发挥抗肿瘤作用。