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丹参酮Ⅱa诱导人胃癌细胞MKN-45凋亡及对端粒酶活性的影响
作者姓名:王亚明  张桂东  尹清臣  朱建平  王静
作者单位:1. 邯郸市中心医院普外一科,河北邯郸,056001
2. 上海市第一人民医院危重病科,上海松江,201620
3. 邯郸市中心医院病理科,河北邯郸,056001
基金项目:邯郸市科学技术与发展计划项目
摘    要:目的 考察丹参酮Ⅱa(tanshinone Ⅱa,Tan Ⅱa)诱导人胃癌细胞的凋亡作用,以及对端粒酶活性的影响.方法 不同浓度TanⅡa处理人胃癌细胞株MKN-45后,显微镜下观察胃癌细胞形态变化,应用Annexin V/PI双重染色方法检测细胞凋亡比例,并用凋亡相关抗体检测通路情况,用RT-PCR以及TRAP-PCR法分别对胃癌细胞端粒酶基因hTert和端粒酶活性进行检测.结果 TanⅡa处理胃癌细胞后,DAPI染色显示,细胞核内染色质聚缩,细胞核碎裂并有凋亡小体产生,提示TanⅡa诱导胃癌MKN-45细胞凋亡.Annexin V/PI双染结果显示,凋亡比例随化合物浓度提高而增加,40μM下晚期凋亡比例达到(45.02±6.48)%.凋亡相关蛋白的检测显示,PARP和Caspase-3活化,细胞色素C水平增加,而Caspase-8则无显著变化.同时TRAP-PCR结果显示,Tan Ⅱa在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调,并在40μM下显著抑制hTert基因的表达.结论 TanⅡa对人胃癌细胞具有明显诱导细胞凋亡作用,且可能通过激活内源性途径引起细胞凋亡.TanⅡa还可抑制端粒酶活性和hTERT基因表达,这些可能是其发挥抗癌作用的重要机制之一.

关 键 词:丹参酮Ⅱa  胃癌  MKN-45  凋亡  端粒酶
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