组蛋白去甲基化酶3调控SESN2 介导的线粒体自噬在脓毒症 心肌损伤中的机制研究

目的 探讨组蛋白去甲基化酶 3（JMJD3）调控 SESTRIN 2 蛋白重组蛋白（SESN2）介导的线粒体自噬在脓毒症 心肌损伤（SIMI）中的作用，并分析其机制。 方法 20 只 SD 大鼠按随机数字表法分为对照组和 SIMI 组，每组 10 只。SIMI 组大 鼠腹腔注射脂多糖（LPS）10 mg/kg（2 mL/kg）构建脓毒症大鼠模型，对照组大鼠按 2 mL/kg 注射 0.9%氯化钠注射液。采用 HE 染色检测大鼠心脏组织病理学变化，ELISA 法测定大鼠血清心肌肌钙蛋白 T（cTnT）、TNF-α 和 IL-6 水平，Western blot 法测定 大鼠心脏组织中 JMJD3 和 SESN2 蛋白表达水平。使用 LPS（10 μg/mL）处理 H9C2 细胞 48 h，构建脓毒症细胞模型，随机分为 对照组、LPS 组、LPS+JMJD3 表达的小干扰 RNA（si-JMJD3）组、LPS+si-JMJD3+SESN2 表达的小干扰 RNA（si-SESN2）组、 LPS+SESN2 过表达（oe-SESN2）组和 LPS+oe-SESN2+JMJD3 过表达（oe-JMJD3）组。细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法测定细 胞活性，原位末端转移酶标记技术（TUNEL）染色法测定细胞凋亡水平，ELISA 法测定细胞培养上清液中 TNF-α 和 IL-6 水平， Western blot 法测定凋亡相关蛋白B 淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2 关联 X 基因（Bax）]、自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链 3 （LC3）、重组人自噬效应蛋白（Beclin1）、选择性自噬接头蛋白（p62）]及 JMJD3 和 SESN2 蛋白表达水平。 结果 与对照组比 较，SIMI 组大鼠心脏组织心肌纤维束排列松散，部分心肌纤维断裂溶解，伴有间质水肿和炎症细胞浸润。与对照组比较，SIMI 组大鼠血清中 cTnT、TNF-α 和 IL-6 水平均升高，心脏组织中 JMJD3 蛋白表达水平升高，而 SESN2 蛋白表达水平降低（均 P＜ 0.01）。与对照组比较，LPS 组细胞培养上清液 TNF-α 和 IL-6 水平升高，JMJD3 蛋白表达水平升高，SESN2 蛋白表达水平降低， 同时，细胞活性减弱，凋亡水平增强（均 P＜0.05）。JMJD3 敲低后 SESN2 蛋白表达水平升高，细胞活性增强，凋亡水平减弱，同 时自噬水平增强（均 P＜0.05），而进一步敲低 SESN2 后，以上趋势发生逆转。相反，SESN2 过表达后，细胞自噬水平增强，细胞活 性增强，凋亡水平减弱（均P＜0.05）；而进一步过表达JMJD3后，SESN2蛋白表达水平降低，同时oe-SESN2对LPS-H9C2的作用 能被oe-JMJD3逆转。 结论 JMJD3通过调控SESN2介导线粒体自噬，促进心肌细胞损伤和凋亡，从而促进SIMI的发展。