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自体浓缩生长因子凝胶治疗肛瘘的疗效及作用机制研究
作者姓名:张秀峰  王厚东  裘建明  鲁振锋  邵书先  沈忠
作者单位:杭州市第三人民医院肛肠科
基金项目:浙江省公益技术应用研究资助项目(LGF20H030002);杭州市卫生计生科技计划项目(2017A26、A20210250);杭州市科技计划引导项目(20171226Y17)
摘    要:目的探讨自体浓缩生长因子(CGF)凝胶治疗肛瘘的疗效及作用机制。方法采用挂线法对6只猪进行肛瘘造模,30d后行瘘管造影及病理检查确认造模成功。将左右侧瘘管按随机数字表法分为凝胶组(填塞CGF凝胶)和对照组;观察两组瘘管创面愈合情况,检测术后第7天瘘管外口组织样本血小板衍生生长因子(PDGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、c-fosmRNA及蛋白表达水平,以及细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路因子[包括丝裂原激活蛋白激酶(MEK)1/2、磷酸化MEK(p-MEK)1/2、ERK1/2、磷酸化ERK(p-ERK)1/2]蛋白表达水平。取人皮肤成纤维细胞(HSF),按随机数字表法分为对照组(10%FBS)、20%CGF组、20%CGF+干扰RNA(siRNA)组、20%CGF+siRNAERK组,采用免疫荧光法检测CGF对HSF细胞增殖能力的影响。结果动物实验结果显示,凝胶组创面愈合时间明显短于对照组(P<0.05),瘘管外口组织样本PDGF、PCNA、α-SMA、c-fosmRNA及蛋白表达水平均明显高于对照组(均P<0.05),p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白水平均明显高于对照组(均P<0.05),MEK1/2、ERK1/2蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。细胞实验结果显示,与对照组比较,20%CGF组、20%CGF+siRNA组HSF细胞增殖百分比均明显升高(均P<0.05);与20%CGF+siRNA组比较,20%CGF+siRNAERK组HSF细胞增殖百分比明显降低(P<0.05)。结论CGF凝胶治疗肛瘘有效,其作用机制是通过上调ERK信号通路因子水平来促进HSF增殖,从而加速瘘管愈合。

关 键 词:自体浓缩生长因子  肛瘘  人皮肤成纤维细胞  血小板衍生生长因子
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