DNA甲基化分析技术的研究进展

近年来,在肿瘤表观遗传学研究领域,DNA甲基化受到越来越多的关注.原因可能是DNA的分子结构相对稳定,提取及保存更为容易,在不同的组织标本中均能被有效检出.然而,要将其真正应用于临床,还亟需发展一种兼具灵敏性、特异性及可操作性的检测手段.目前一般认为有两种甲基化检测思路[1]:即甲基化分型和甲基化组学.前者通常是对单个基因或较少基因进行检测,后者则是对全基因组进行甲基化分析,又叫甲基化谱.本文围绕这两类检测技术及其在临床检验方面的应用价值进行综述.1 甲基化分型1.1 甲基化特异的聚合酶链反应(MSP) MSP的原理是将重亚硫酸盐处理后的DNA作为模板,在基因启动子5’端富含胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)位点的甲基化多发区域设计两对引物,一对针对甲基化的模板,另一对针对未甲基化的模板,通过凝胶电泳法,判定哪一对引物能有效扩增出目标基因,以此作为甲基化与否的标准.此法简单且易于操作,是目前应用最为广泛的甲基化定性分析手段.