UW液用于大鼠离断肢体灌注保存的实验研究

目的：探讨用 UW液灌注离体断肢以延长其活性的效果。方法：选择雄性健康成年 Wistar大鼠20只,体重300～400 g,手术离断双下肢。实验分两部分。实验一：随机选择10只大鼠,再随机分为灌注组（4℃下采用 UW液自股动脉灌注离断肢体直至灌出液清亮为止）和对照组（不予灌注直接冰箱保存）,每组5只。两组均置于4℃冰箱内低温保存24 h,肢体离断后每间隔6 h取离断肢体肌肉组织行病理学观察。实验二：另10只大鼠随机分为连续灌注组（4℃下以12 ml/h的速度持续灌注 UW液24 h）和间断灌注组（4℃下于肢体离断后4、8、12、16、20和24 h以12 ml/h的速度分别灌注 UW液20 min）,每组5只。离断肢体在4℃冰箱内保存灌注24 h,收集离断后4、8、12、16、20和24 h 的灌注流出液,检测碱性磷酸酶（ALP）、丙氨酸转氨酶（ALT）、葡萄糖（GLU）含量,同时在离体12 h、24 h取肌肉组织标本,行 HE 染色观察组织结构变化,透射电镜观察其细胞超微结构的变化。结果：实验一：在各相同时间点,灌注组较对照组肌纤维水肿程度轻,断裂少,细胞较少发生横纹溶解。实验二：连续灌注组与间断灌注组比较,肌纤维均轻度水肿,细胞出现横纹溶解,线粒体肿胀,发生破裂及空泡化现象,两组病理及超微结构改变程度相似,各时间点两组之间 ALP、ALT、GLU 差异无显著性（P＞0.05）。结论：使用 UW液对离断肢体进行灌注后低温保存效果更好。UW液24 h 间断灌注与24 h 连续灌注两种方法对离断肢体的保护效果相当。