金属硫蛋白对离体缺血再灌注未成熟心肌细胞功能的影响

背景：实验已证实金属硫蛋白对成熟心肌有保护作用,但对于未成熟心肌的保护作用尚缺乏实验证据.目的：探讨诱导金属硫蛋白在未成熟心肌中的表达及对缺血再灌注未成熟心肌细胞功能的影响,为未成熟心肌的保护提供有效的方法.设计：完全随机分组设计,对照实验.单位：青岛大学医学院附属青岛市立医院妇产科和心脏外科,华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科.材料：实验于2001-10/2002-09在华中科技大学同济医学院药理实验室（安全级别一级）完成.选用出生14～21 d日本长耳大白兔27只,雌雄不拘.随机将兔分为4组：对照组9只,腹腔注射ZnSO4 12,24,48 h组各6只.方法：①对照组：腹腔注射蒸馏水0.3 mL,按注射后12,24和48 h取离体心脏,灌注重碳酸氢盐缓冲液15 min转为工作心15 min,全心停灌45 min,恢复灌注15 min改为工作心30 min.腹腔注射Zn-SO412,24,48 h组：分别按腹腔注射36 g/L ZnSO4 12,24和48 h后取离体心脏,余方法同对照组.②计算心肌肌酸激酶和乳酸脱氧酶15 min漏出率=心肌肌酸激酶（乳酸脱氢酶）（IU/L）&;#215;15 min漏出液（L）/1000&;#215;心肌湿重（g）].③采用荧光素酶法心肌组织三磷酸腺苷含量.④心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性按Jones方法在Shimadzu UV-1200型紫外分光光度计上测定.⑤在电感耦合等离子体原子发射光谱仪上测定线粒体Ca2＋含量.⑥取制备的心肌线粒体悬液按Nayler法测定线粒体合成三磷酸腺苷能力.⑦采用109Cd-血红素饱和法测定心肌组织中金属硫蛋白含量.组间计量资料差异比较采用t检验.主要观察指标：各组兔心肌细胞中金属硫蛋白含量、肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、三磷酸腺苷含量、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性及线粒体Ca^2＋含量、心肌线粒体合成三磷酸腺苷能力比较.结果：日本长耳大白兔27只均进入结果分析.①乳酸脱氧酶漏出率、肌酸激酶漏出率、心肌Ca^2＋含量、线粒体Ca^2＋含量：腹腔注射ZnSO424,48h组明显低于对照组和腹腔注射ZnSO412 h组（P＜0.01）;.②心肌三磷酸腺苷含量、心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性、心肌线粒体合成三磷酸腺苷能力、心肌金属硫蛋白含量：腹腔注射ZnSO4 24,48 h组明显高对照组和腹腔注射ZnSO4 12 h组（P＜0.05～0.01）.结论：腹腔注射ZnSO4可诱导心肌金属硫蛋白长时间表达,金属硫蛋白可减轻未成熟心肌细胞缺血再灌注损伤.

Effect of metallothionein on the function of in vitro immature cardiomyocytes with ischemia-reperfusion injury