| 人SPOP真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 曾春艳,罗时文. 人SPOP真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达[J]. 重庆医学, 2015, 0(17): 2335-2337. DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2015.17.011 |
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| 作者姓名： | 曾春艳 罗时文 |
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| 作者单位： | 1. 南昌大学第一附属医院肿瘤科,南昌,330006;2. 南昌大学第一附属医院科研中心,南昌,330006 |
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| 基金项目： | 江西省研究生创新专项资金 |
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| 摘 要： | 目的 构建人pUB6/V5-HisB-SPOP真核表达质粒及稳定表达外源性人SPOP基因的人胃癌AGS细胞系.方法 采用基因重组技术将人SPOP cDNA插入真核表达载体pUB6/V5-HisB,构建人pUB6/V5-HisB真核表达质粒.脂质体介导空载体pUB6/V5-HisB和表达质粒pUB6/V5-HisB-SPOP分别转染人胃癌AGS细胞株,杀稻瘟菌素筛选阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测SPOP mRNA和蛋白表达.结果 双酶切和基因测序结果均证实人pUB6/V5-HisB-SPOP真核表达质粒构建成功.SPOP转染组与空白对照组、空载体组比较,SPOP蛋白表达显著上调(P＜0.05).结论 成功构建人SPOP真核表达质粒并获得稳定表达SPOP基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究SPOP基因在胃癌发生发展中作用奠定实验基础.
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| 关 键 词： | 胃肿瘤 SPOP AGS细胞 基因表达 |
The construction of SPOP-V6/His and cell model with up-regulation of SPOP in human gastric cancer cell line AGS |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | stomach neoplasms SPOP AGS gene expression |
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