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大鼠STAT3基因靶向shRNA真核表达载体的构建及鉴定
引用本文:张五星,周伟,赵学伟,丁晓然,周喆,张智敏,周焕芝,石炳毅. 大鼠STAT3基因靶向shRNA真核表达载体的构建及鉴定[J]. 山东医药, 2010, 50(17): 13-15
作者姓名:张五星  周伟  赵学伟  丁晓然  周喆  张智敏  周焕芝  石炳毅
作者单位:1. 解放军第309医院全军移植中心,北京,100091
2. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所
基金项目:全军"十一五"青年基金资助项目 
摘    要:
目的针对大鼠信号转导子及转录激活子3(STAT3)基因序列,构建特异性短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体。方法根据STAT3基因序列及shRNA设计原则,设计4条干扰效果最佳的shRNA,化学合成4对引物,通过PCR扩增获得dsDNA模板,采用DNA重组技术与pGCsi-U6/Hygro/GFP空载体连接,转化DH5a感受态细胞经诱导表达筛选阳性克隆子,抽提重组质粒,进行DNA测序鉴定。结果转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,测序结果与所设计的STAT3 shRNA转录模板序列一致。结论所设计的shRNA编码序列被正确地插入到质粒骨架中,成功构建了STAT3基因的shRNA表达载体。

关 键 词:信号转导子及转录激活子3  短发夹RNA  质粒  RNA干扰

Construction and identificaiton of rat STAT3 shRNA eukaryotic expressing vectors
ZHANG Wu-xing,ZHOU Wei,ZHAO Xue-wei,DING Xiao-ran,ZHOU Zhe,ZHANG Zhi-min,ZHOU Huan-zhi,SHI Bing-yi. Construction and identificaiton of rat STAT3 shRNA eukaryotic expressing vectors[J]. Shandong Medical Journal, 2010, 50(17): 13-15
Authors:ZHANG Wu-xing  ZHOU Wei  ZHAO Xue-wei  DING Xiao-ran  ZHOU Zhe  ZHANG Zhi-min  ZHOU Huan-zhi  SHI Bing-yi
Affiliation:ZHANG Wu-xing1,ZHOU Wei,ZHAO Xue-wei,DING Xiao-ran,ZHOU Zhe,ZHANG Zhi-min,ZHOU Huan-zhi,SHI Bing-yi(1 Transplantation Center of 309th Hospital of People's Liberation Army,Beijing 100091,P.R.China)
Abstract:
Keywords:
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